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已經一百個日夜了
親愛的八中
親愛的母親
孩兒想您啊
孩兒忘不了
『實驗中學四個鎏金大字
孩兒忘不了
周一早晨雄壯的國歌
孩兒忘不了
一句句發自肺腑的教誨
孩兒忘不了
操場上一聲聲爽朗的笑
在您的懷抱里
孩兒長高了
孩兒長大了
孩兒懂得了
人生要一步一步地走
孩兒記住了
實踐中探理
驗證中求真
離開你
已經一百個日夜了
親愛的八中
親愛的母親
孩兒想您啊
高墻內的考古謊言
1965年,李金培出生在被稱為六朝古都的河南省開封市。從開始懂事時起,他就跟著盜墓的爺爺和父親四處偷挖古墓,久而久之,掌握了不少考古和挖掘古墓的知識。
上世紀90年代初,有關部門為充實考古隊伍,決定招考一批熱愛考古事業又有一定專業知識的社會人士。李金培一路過關斬將,最終成了一名拿國家工資的考古工人,從此開始了人生的積極轉變。1995年,李金培調到湖北荊州地區,隨后又作為單位的優秀人才被送往武漢某重點大學考古專業學習,接受正式、系統的專業教育。由一個初中沒畢業的“盜墓人”到名牌大學的進修生,李金培實現了人生的飛躍。
然而好景不長,3年后,李金培偶然遇到了一個因倒賣文物而發財的老鄉,使他的價值觀發生了扭曲。當時,李金培正急需一大筆錢安置新家,為此,他利用工作之便將一件文物倒賣給了老鄉,并獲利10萬余元。但是事情很快就敗露了,他被判入獄7年。
清醒過來的李金培后悔不迭,最讓他放心不下的就是遠在陜西的妻子和女兒茵茵。茵茵是一個非常好強的女孩兒,漂亮又懂事,在學校門門功課都是優秀。每次受到別人表揚時,她都會說:“我爸爸才是個了不起的人!”
案發后,李金培請求執法部門不要將這個消息告訴老家,尤其不能讓面臨初中升學考試的女兒知道。他的妻子哭著搖頭說:“你不是7天不能回家,而是7年不能回家!叫我怎么瞞得住孩子?”李金培知道,茵茵最喜歡歷史,特別是對埃及金字塔法老的詛咒很感興趣。于是,李金培央求妻子說:“告訴茵茵我去埃及考古了,要等任務完成了才能回去看她。你能瞞多久就瞞多久吧。我寧愿娃兒將來恨我,也不愿意在這節骨眼兒上讓她傷心,娃兒的自尊心強著呢!”
妻子勉強答應了替他撒謊,李金培感到心情稍稍平靜了一些。但離開看守所,被押送到監獄服刑后,他的思想又發生了動搖。因為每天都要到工地參加勞動,吃的是簡單的飯菜,睡的是簡陋的通鋪,一想到漫長的7年都沒有任何自由。站在烈日下的李金培頓時對前途失去了信心。他認為自己的刑期判得太重,漸漸地對改造產生了反感情緒。
因為拒絕改造,李金培被關了禁閉。走出禁閉室后,他要求跟家人通電話,干警卻告訴他,親情電話取消了。如果3個月內他還是拒絕改造。那么仍然享受不到家屬接見和親情電話的獎勵。由于內心的孤獨。李金培的愛女之情越來越重了。為了能聽到女兒喊聲爸爸,他不得不從行為上開始轉變。3個月后,他終于被允許走進電話室。
女兒早就等在電話前了,當李金培聽到女兒甜甜地叫著“爸爸,是爸爸嗎?”他的眼淚頓時奪眶而出,泣不成聲。良久,他才輕輕地答應了一聲:“娃兒,是爸爸!”茵茵立刻激動起來:“爸爸。你在埃及挖到了什么,什么時候才能回來?”他望著窗外高高的圍墻說:“娃兒,爸爸正在這邊挖古城墻呢。你知道嗎?這邊的老國王比咱們家鄉要多得多。我們找到一座古城堡,這需要好長時間呢!”茵茵深信不疑地說:“爸爸,你就在那邊好好干吧,讓外國人看看咱們中國人有多厲害!”
這次通話后。李金培干枯的靈魂像打了一針強心劑突然鮮活起來。在別人眼里,他是為人所不齒的罪犯,而在他最在乎的人心里,他卻是偉大的,這就足夠了。為了能及時跟女兒通電話,他的改造越來越積極。
告別過去 闖蕩埃及
不久,茵茵向他報告了一個好消息――升學考試她考了全班第一名!見父親一直為不能帶她進省城讀書而道歉,茵茵安慰道:“爸爸,您別內疚了。等考高中時,我再考個第一,那時你肯定回家了,我不就可以進省城了?”李金培心虛地在電話里哼哈應承著。
這次通話中,李金培遇到了一個難題,茵茵向他要一些埃及的風光照片。李金培只好流稱他在沙漠里,為了保密不能拍照。他知道茵茵愛動腦筋,以后她的問題會越來越多,如果自己招架不住,她一定會起疑的。從此,維護在女兒心中的形象成為他最大的夢想和追求。以前李金培接觸的都是文物挖掘方面的知識,對埃及的了解只限于金字塔和尼羅河,于是他開始主動找監獄干部要一些有關埃及的歷史書籍看。
一來二去,父女倆聊得越來越深入,茵茵對埃及歷史的了解已遠遠超過了同齡人。李金培有時會故意將話題岔開,問問茵茵的生活,但令他心痛的是,茵茵對此總是閃爍其辭,這讓李金培察覺到家里發生了變故。因為去年來探監兩次的妻子今年一次都沒來過。不久,他的猜想得到了印證。當妻子再次出現時。向李金培提出了離婚。
雖然李金培痛恨妻子的無情無義,但為了孩子,他不得不低聲下氣地懇求妻子。可是妻子已有了再婚人選,而且態度非常堅決,甚至要去法院判決離婚。妻子說:“我跟你一樣撒謊說到外面去工作,孩子就跟著她奶奶。至于我為什么離開她,這個問題留著你今后跟她解釋,因為先錯的不是我!”
這之后,李金培開始害怕跟女兒聊天,更擔心她追問埃及。他的思想再次出現了波動,不僅拒絕改造,還在監獄里拉幫結派制造事端。他沉浸在仇恨的泥潭里,不再給茵茵打電話。他料定孩子已經知道了一切,謊言無需再繼續,他打定主意將牢底坐穿或者就這樣死去……
2002年6月,監獄嘗試用最后一個辦法拯救李金培――讓他跟女兒通電話。電話那端仍然是他熟悉的聲音:“爸爸,是爸爸嗎?”事隔一年,孩子的問候沒有變,愛他的心也沒有變。李金培握著電話的手開始顫抖,愧疚、憐愛、傷心、喜悅一齊涌上心頭,匯聚成輕輕的一句:“娃兒,是我……”“爸爸,挖掘成功了嗎?你要回來了嗎?”“不,娃兒,還得等一段時間呢……”茵茵在電話那頭撲哧一聲笑了:“爸爸。我都要考高中了,你還不回來的話,考大學的時候,我就直接考到埃及去算了。我到沙漠里去找你!”李金培的心疼得更加厲害了,他含淚回答道:“娃兒,我相信你能做到。我在埃及等你!”
通話之后,李金培像變了一個人,他決定擺脫一切惡習,潛心改造。2004年。因為有重大立功表現,他獲得減刑獎勵。當年6月18日,他終于走出了監獄。幾乎是下意識的。他輾轉武漢,買了一張去開封的火車票。想回家看看朝思暮想的女兒和母親。
臨上車前,李金培在街上轉悠。幾年過去了,他那乖巧的茵茵也該出落成大姑娘了吧?她會相信眼前落魄的父親是從埃及考古歸來的功臣嗎?他怎么解釋媽媽的離開?她明年就高三了,如果知道爸爸對她撒了一個彌天大謊,還會朝著夢想奮斗嗎?一連串的疑問讓李金培停止了腳步,他捏著車票來到退票口,咬
咬牙將票退了。
女兒拯救了他的靈魂,他要幫她實現夢想。重新走出火車站的李金培找到了明確的方向:去埃及!他前所未有的瘋狂,也前所未有的振作,他認為這是拯救父女關系的惟一出路。當時,他的兜里僅有一點兒微薄的安置金,只夠到埃及的半張機票錢,但他知道怎樣打通前往埃及的路。
李金培先找到進修期間的一位老師,講述了這5年他與女兒茵茵之間發生的故事。這位老師非常同情他,幫他找到了一個當“挖工”的機會,由此得到了一筆報酬。李金培又在老師的幫助下,申請到了埃及的自助旅游簽證,于2004年底登上了開往埃及的航班。
九死一生父女重逢
到達開羅后,李金培做的第一件事就是跑到開羅附近的吉薩金字塔拍了一張留影,給女兒寄出了發自埃及的第一封信。為了圓謊,李金培說自己獲得了一次休養的機會,可以走出沙漠自由活動一段時間。
剛下飛機時,李金培對自己申請工作簽證并獲得埃及長期的居留權相當自信。他認為,自己的考古特長在埃及應該大有用武之地。但是他很快得知,外國人若想在埃及合法考古,必須獲得埃及最高文物委員會的批準,而委員會向來只跟歐洲一些大博物館的專家合作。此前,李金培為了掩飾那段犯罪的歷史,臨走前沒敢回原來的工作單位開介紹信,現在他沒有任何身份證明,沒有人會相信他是一個文物挖掘專家。
此時,李金培所有的家當只剩下1000埃鎊,就算怎么省吃簡用,最多也只能支撐半個月。迫于生計,他只好在開羅一家小中餐館落下腳。從事炒飯的工作。在這半年里,他學會了一些簡單的阿拉伯語,也積攢了一些錢,老板對手腳勤快的他很看好,打算替他申請打工簽證。李金培覺得這樣也能將日子混下去。甚至打算自己開一家小型飯店,等發財后將茵茵接到埃及。
2005年8月,茵茵以620分的好成績考上了武漢大學。她在電話里興奮地告訴爸爸,她填的是歷史專業!李金培第一次感到了震驚,他相信女兒憑借自己的努力一定能來埃及,如果讓她看到爸爸原來當的是廚子,那他多少年來為圓謊付出的一切都將付之東流。
于是,李金培開始了第二次冒險。他來不及等簽證下來,就結清工資,跑到了西部靠近利比亞的塞盧姆省。一個從沙漠出來的當地人告訴他,在塞盧姆沙漠里住著許多外國考古隊,需要雇傭一些有經驗的隊員,而且報酬非常高。
就在圣誕節前夕,李金培來到波蘭專家駐扎的一個神廟,想謀一份工作。在擁擠的巴士上,他與旁邊一個戴眼鏡的歐洲人聊天時,如實地告知了自己在中國的從業經歷。那人聽后,立即說:“下車后。你跟我走!”李金培大喜過望。
那人將他帶到神廟附近的一間簡易房內,問了他一些挖掘知識,就很快通知他被錄用了,并給他開了十分誘人的工資――每天300埃鎊。兩天后,李金培和幾個埃及人被一輛吉普車送到沙漠深處一個戈壁地帶,那有一處已經開挖的古墓群。因為天氣很冷,人手不夠,工程進度相當緩慢,李金培等人到達后,夜以繼日地工作。一天。他被叫到一個坐在帳篷里的老頭兒跟前,那人問他怎樣能在最短的時間內找到主墓穴,他提出了點挖。
當天,李金培自制了一把洛陽鏟,配合他們的金屬探測儀,在已經挖得遍地開花的荒漠上四處踩點。他把工具去再抽出來,哪是生土(沒有動過的土)、哪是熟土(回填過的土),他一看便知。通過這種方法,很快找到了主墓穴的位置。
老頭兒非常高興,將李金培提升為指揮。不久,他發覺這些人好像不是一個合法的考古隊,更像是有組織的盜墓者,一次偷聽印證了他的猜想。因為害怕被抓而永遠地被驅逐出埃及,那樣將沒有機會見到女兒,李金培想伺機逃跑。
太陽漸漸地落入了地平線。李金培借口加班,一直待在深深的洞穴里。入夜后。他悄悄地沖進了茫茫的沙漠……他幾乎是不辨方向地狂奔了一整夜,天亮時,他傻眼了――除了耀眼的陽光和四處黃沙。周圍什么也沒有。李金培朝著日出的方向走去。從日出走到日落,連只鳥都沒看見。第二天。他繼續往東行走,水喝干了,隨身帶的一點兒食物也吃完了。天黑的時候,他實在支撐不住,昏倒在地。第三天,一陣灼熱將他烤醒。刺眼的太陽已經高高掛在天上。隱約中,他看到遠處有一支駝隊正在行進,他爬起來,拼盡最后的力氣向他們靠近……
當李金培再次醒來時,正被一群說英語的旅行者包圍著。通過隨隊的埃及向導。他們弄清楚了這個中國人的遭遇。其中的一個英國長者對他說,埃及有許多外國盜墓集團專門雇傭沒有身份的黑工,目的達到后。就將這些人殺死在墓穴中,然后卷起“寶貝”逃之夭夭。李金培嚇出了一身冷汗,幸虧逃得及時,否則等不到見女兒就已命喪異鄉了!
這個英國人叫羅伯特,是位來自大英博物館的學者。他給李金培留下了一個電話,叫他3個月后打給他。脫險后,李金培回到了塞盧姆首府,并毅然地走進了警察局。沒過幾天,當地報紙登出了一條新聞――警察在沙漠深處查獲了一個盜墓集團,抓獲了為首的法國人。報道中還特別提到了李金培在破案中起到的巨大作用,他由此獲得了在埃及的合法居留權。
隨后,李金培找到了一份修復神廟建筑的工作。其間,他跟女兒通了一次電話,得知她選修了《古埃及學》這門功課,李金培更加緊張了,埃及的考古新動向她都可以上網了解到,他不能再對女兒撒不著邊際的謊了。
3個月后,李金培如約將電話打給了羅伯特博士,羅伯特讓他到埃及與巴勒斯坦交界處的伊斯梅利亞地區去,博士在那兒組建了一個考古隊。當李金培到達后,羅伯特對李金培的風水學說和手中的洛陽鏟非常感興趣,因為他知道古代埃及的星象學跟中國風水理論有著許多相近的地方。李金培因此成為了一名正式的指揮員,也獲得了在埃及考古的合法證件。
李金培和羅伯特一行人在廣袤的沙漠中進行著艱難的搜尋。2007年6月,他們終于發現了一條軍用古道。他們將先進的考古儀器和李金培古老的工具、理論相結合。探測到一座掩埋在地下的古城堡。城堡規模宏大,周邊環繞著許多古墓。開挖的那天,博士激動地和李金培緊緊地擁抱在了一起。
第一批文物出土后,埃及文物管理委員會對媒體宣布:這一發現是埃及10多年來最重大的考古成就。由于李金培對此次考古工作的突出貢獻。文物管理委員會特別對他進行了嘉獎。不久,李金培對羅伯特博士提出了一個特殊的要求,邀請他遠在中國的女兒到現場來看看。羅伯特起初不解其意,當聽說李金培與女兒的故事后,這個滿臉滄桑的老博士給了李金培一個深深的擁抱:“沒有比在一座新出土的城堡上,跟闊別10年的女兒重逢更有意義的事情了。我很羨慕你有親人來分享成功!”
2007年lO月16日,茵茵抵達開羅國際機場。當羅伯特的助手將茵茵帶到挖掘現場時。李金培慢慢地站起了身……
夕陽下,一個身材高挑、披著長發的姑娘快步朝他走來,邊走邊喊:“爸爸,是爸爸嗎?”記憶的洪水霎時卷過李金培的心頭,他不知道該怎樣迎接這一重要的時刻,只是伸出滿是塵土的手說:“娃兒,是爸爸!”父女倆緊緊地擁抱在一起,任憑幸福的淚水橫流。為了這個擁抱,這個堅強的漢子奮斗了10年!
入夜,19歲的女兒和李金培睡在一個帳篷里,兩人絮絮叨叨說到很晚,可李金培就是不敢提自己坐過牢的事。茵茵睡熟后,李金培替女兒清點行李,在她的旅行包里有一本厚厚的日記,上面記載著李金培和茵茵第一次通話后發生的許多事情。看著看著,李金培的眼眶濕潤了:其實,早在妻子和他離婚前,茵茵就已經知道他坐牢的事了――茵茵無意間聽到了媽媽和奶奶的一次談話。奶奶懇求媽媽別離開這個家,但媽媽卻說:“還有5年啊,即便從牢里出來了,也沒人瞧得起他,以后的苦還是沒個盡頭。人家做生意的大方著呢,他愿意負擔茵茵的學費。為了孩子著想,您也不應該怪我!”
那年茵茵才上初二,她沒有讓媽媽帶她一起走,她知道,爸爸對她撒謊,是不想讓她知道自己做錯了事。如果他打電話回來找不到她,就不會繼續改正錯誤了。在這種信念的支撐下,茵茵裝作一無所知的樣子,和他在電話里談論所能收集到的埃及知識。她以為爸爸真的還要在監獄里呆5年,于是刻苦學習。她想讓爸爸出獄時看到她已經在大城市讀書了。兩年前,收到爸爸發自埃及的照片后,她高興極了,那一刻,她知道爸爸又變回努力上進的爸爸了。
大家下午好!
冰雪消融,化作千頃碧波;書聲朗朗,鋪就錦繡前程。不知不覺間,高考僅有三月;無聲無息中,龍門逼臨百日。初春乍寒,春寒料峭,經歷了無數寒風凜冽的冬天,我們全體高三學子終于迎來了十年寒窗中最后一個心中暖洋洋的春天。在這個春意融融、生機勃勃的季節里,我們歡聚一堂,隆重舉行高考“百日沖刺”誓師大會,此時,群情激昂、熱血沸騰,氣氛凝重而又熱烈!此刻,包場中學有如神舟飛船的發射場,而你們,就像一枚枚蓄勢待發的神舟火箭,矗立在巍峨的發射塔架上。百日之后,你們將呼哮著、轟鳴著、升騰著,帶著夢想翱翔長空!
作為一名老師代表,我很榮幸能和各位一起分享這具有歷史意義的偉大時刻。在此,請允許我代表全體高三老師向關心我校教育教學,關心孩子成長的各位與會家長表示衷心的感謝!向孜孜以求、奮力拼搏的全體高三同學表示最良好的祝愿!希望大家在最后一百天中,不拋棄,不放棄,有生氣,添喜氣。
讀書十年,決戰百天。剩下一百天,彈指一揮間,從現在開始,你們就已進入到了高考的沖刺階段,此時此刻,我們全體高三老師的心與你們一起跳動,在你們出征之前,我們老師是你們的戰友;在你們蓄勢待發之際,我們是你們的導航;在你們展翅騰飛之時,我們是你們堅強的后盾!
三年的時光里,作為你們的老師,我們朝夕相伴,真的有幸陪同大家一同走過了你們生命中最亮麗的青春花季,那每一個陽光遍地,書聲朗朗的清晨,那每一個樸實真誠,燦爛如花的笑臉,那每一個激情四射,青春驛動的身影,都將是停泊在我們心湖中最美好的記憶.只為這一刻,讓我們一同攜手,艱險同擔,風雨同行,向理想的彼岸前行.因為你們的理想彌補著老師的遺憾,你們的努力延續著老師們青春的驛動,你們的成功就是老師們的追求與幸福.
作為你們的老師,我們甘愿全力以赴、傾其所有;我們愿意把自己當成一個即將參加高考的學生一樣與你們一道并肩戰斗、風雨同舟。你們是幸福的,我們就是快樂的,你們是進步的,我們就是欣慰的,你們是成功的,我們才是最優秀的。我們愿意記住因你們的存在而變得生機勃勃的黎明和黃昏,我們更愿意記住揭榜之時那一張張燦爛如花的笑臉。可是,光榮的桂冠從來都是用荊棘編成的。接下來的一百天的時間里,老師們也許對你們有更苛刻的要求,更艱苦的訓練,更嚴厲的批評,甚至有些言語和做法令你們難以接受。但我們相信已經長大了的你們能夠理解,因為作為一名教師所做的一切,都是為了自己的學生能夠有所作為,能在百天后如大鵬一日同風起,扶搖直上九萬里。
關鍵詞:中藥;胃癌;BGC-823;侵襲
四藤方由紅藤,野葡萄藤,藤梨根,菝葜四藥組成,來源于我院著名腫瘤專家邱佳信教授臨床驗方“胃腸安方”中的小拆方,我的導師沈克平主任認為此四味中藥補中有泄,抗胃癌同時不傷正氣,尤其適合胃癌患者。故導師治胃癌患者以此為基礎辯證與辨病相結合預防胃癌復發收效甚捷。前期研究證實四藤方具有一定抑制胃癌轉移的作用,本實驗進一步進行了四藤方在胃癌侵襲轉移方面的作用和機制的探索。
1 資料與方法
1.1實驗材料 ①中藥材四藤方(紅藤,野葡萄藤,藤梨根,菝葜)由龍華醫院藥材科提供,產地明確,經第二軍醫大學藥學院生藥學教研室鑒定。②主要試劑RPMI 1640培養基、0.25%胰蛋白酶和胎牛血清(PAA公司產品);甲基噻唑基四唑(MTT)(美國Sigma公司);BGC-823細胞購于中科院上海細胞所,細胞培養皿等耗材為Conming公司產品;Trizol為Invitrogen公司產品;反轉錄試劑Reverse Transeriptase M-MLV、RNase Inhibitor、Oligo d(T)18、dNTP Mixture和RealTime PCR檢測試劑盒均為TaKaRa公司產品;
1.2主要儀器及設備細胞培養箱 日本(三洋;離心機、紫外分光光度計、熒光分光光度計和酶標儀,均鉤于美國Thermo公司;梯度PCR和RealtimePCR儀均為Ft本TaKaRa公司產品;倒置相差顯微鏡,日本Olympus公司產品。
1.3方法
1.3.1四藤方藥物的提取 將四藤方飲片(菝葜、野葡萄藤、藤梨根等)浸泡30 min,煎煮2次,30min/次,紗布粗慮去渣,將所得濾液以5000 轉離心30min以初步去掉大的顆粒雜質。取清液濃縮至300ml,加等體積的無水乙醇后置于4℃ 冰箱過夜沉淀。取出各藥物與乙醇的混合液,再以5000轉,30min離心,取上清液旋轉蒸發回收乙醇濃縮藥液,濃縮至50ml左右時取出,室內揮發24h后冷凍干燥,當藥物成粉末狀時取出,稱重,臨用時用磷酸鹽緩沖液(PBS)溶解,0.22pure微孔濾器過濾除菌。
1.3.2實驗分組和干預 實驗時將細胞分為空白組、藥物干預組(組加人不同濃度四藤方(1、10、100、1000、10000μg/ml),其中空白組使用不含藥物的RPMI完全培養基培養,收集細胞樣本進行mRNA含量檢測,取處理后不同時間點細胞樣本進行細胞活性檢測。
1.3.3 BGC823細活性檢測將對數生長期的BGC823細胞使用胰酶消化,1000轉離心5min收集細胞沉淀,使用含10%FBS的RPMI 1640培養基調整細胞濃度至2.5×105個/ml每孔200ul。接種于96孔板,每組設5個平行孔,正常條件培養,于第24、48、72h,各取一塊培養板,每孔添加濃度為15 mg/ml的MTT,緩慢晃動培養板其在培養基均勻分布,正常條件共孵育4h,去培養液,加入DMSO150ul的溶液,于37℃溫育4h,100rpm震蕩10min。使用酶標儀檢測波長為570nm吸光值。
1.3.4 Realtime-PCR測定E-cadherin mRNA含量 各干預組BGC823細胞培養24h,收集細胞樣本,進行E-cadherin mRNA含量檢測。使用Trizol法提取細胞樣本的Total RNA,電泳判斷總RNA的完整性,紫外分光檢測RNA純度及濃度。使用M-MLV逆轉錄體系及Oligo(dT)18 Primer引物逆轉錄制備cDNA。設計用于定量檢測的PCR引物,引物序列如下:E-cadherin的上游引物序列為5'-GAACGCATTGCCACATAC-3',下游引物序列為5'-ACCTTCCATGACAGACCC-3'。內參為甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH),其上游引物序列為5'-GACAGTCAGCCGCATClTCT-3',下游引物序列為5'-ACATGTAAACCATGTAGTTGAGGT-3'。PCR引物設計好之后,PCR驗證引物擴增效率和引物特異性,然后使用熒光染料法(SYBR)進行PCR反應。反應結束后,獲得實驗曲線和數據,進行數據分析。
1.3.5胃癌細胞BGC823侵襲力檢測使用劃痕實驗 使用含10%FBS的RPMI 1640培養基各組BGC-823細胞按5×105/L接種于6孔板中,細胞生長到80%~90%時,用200μl的槍頭沿著孔中央直徑線做劃痕,PBS洗1次,實驗組加入中藥四藤方(濃度為100μg/ml),為了排除增殖對遷移實驗的影響,每組設3個復孔。置培養箱中繼續培養24h后取出6孔板,分別在0h,24h倒置顯微鏡下觀察劃痕愈合情況。比較各組細胞細胞向劃痕邊緣向劃痕內遷移的細胞數。
1.4統計學方法 采用方差分析(ANCOVA)及LSD兩兩比較法。應用SPSS15.0軟件進行方差分析及總體比較;P
2 結果
2.1 BGC-823細胞增殖率檢測 通過MTT檢測可以發現,含不同藥物體積的培養液均能不同程度的抑制BGC細胞的生長與增殖,且培養液內藥物含量越高,培養時問越長,細胞生長受到的抑制作用也越明顯,見表1。不僅與對照組相比具有統計學差異(P
2.2 BGC-823細胞E-cadherin mRNA表達 通過Rt-PCR檢測可發現,四藤方ID50濃度干預的細胞,24h后E-cadherin mRNA的表達明顯高于對照組細胞(P
2.3細胞侵襲力實驗(劃痕實驗) 劃痕愈合實驗顯示,使用四藤方ID50濃度干預24h后,侵襲力較對照組組下降,明顯抑制人胃癌細胞株BGC-823的遷移,實驗組劃痕愈合率為(47.454~10.05)%,對照組劃痕愈合率為(88.23±5.45)%(P
3 討論
E-cadherin又被稱為上皮-鈣黏蛋白,定位于16號染色體長臂2區2帶,含有16個外顯子、15個內含子,全長約100 kb,其編碼的跨膜糖蛋白相對分子質量為124×103。E-cadherin廣泛分布于人類上皮細胞中,是鈣依賴的黏附分子家族成員之一,可介導正常細胞間的黏附,維持正常上皮細胞形態、極性及組織結構的完整性,同時還參與細胞內信號傳導[1~3],當E-cadherin表達下降或缺失時,細胞間的相互黏附力下降,一旦獲得轉移的必要條件,就可脫離原發灶而發生侵襲和轉移[4]。因此,E-cadherin被認為是一種抑癌基因。
本實驗結果顯示中藥四藤方作用24h后可明顯抑制人胃癌細胞株BGC-823細胞的增殖。通過劃痕愈合實驗,我們發現中藥四藤方ID50濃度作用24h能明顯抑制人胃癌細胞株BGC-823的遷移。提示四藤方在降低胃癌的侵襲力方面可能具有一定抗腫瘤的作用。為了研究四藤方降低胃癌侵襲力的作用機制,我們檢測了ID50濃度的四藤方作用24h后BGC-823細胞 E-cadherin mRNA的表達量明顯提高。
四藤方由紅藤,野葡萄藤,藤梨根,菝葜四藥組成,大血藤,又名“大活血”、“紅藤”等,根據《中國藥典》記載,大血藤氣微,味苦微甘,性平,無毒,入肝、胃、心包、大腸經。具解毒消癰,活血止痛,祛風除濕,殺蟲功效。其中紅藤的粗提取液被發現具有很強的抗腫瘤活性[5]。野葡萄藤,《廣西植物名錄》:清熱利濕,消腫解毒。治痢疾,瘡瘍腫毒。有多項實驗研究發現其單獨具有抗胃癌功效是專病專藥[6]。藤梨根《全國中草藥匯編》清熱解毒,祛風除濕,利尿止血。用于風濕骨痛,以及黃疸等癥。有多項實驗研究發現其單獨具有抑制胃癌[7]的功效,屬于專病專藥。菝葜見《別錄》:“味甘,平溫,無毒。”《品匯精要》:“散腫毒。”紅藤、藤梨根清熱解毒,菝葜、野葡萄藤消腫祛濕。在前期實驗中我們發現示四藤方可以上調SGC -7901 胃癌Caspase -3 蛋白表達,促進PARP 蛋白剪輯,抑制Livin表達,從而促進細胞凋亡[8]。
本研究結果首次表明,中藥四藤方在體外可以有效抑制人胃癌BGC-823細胞株的增殖和遷移,其機制可能是通過促進BGC-823細胞E-cadherin mRNA表達,進而發揮了抑制胃癌細胞遷移的作用。
參考文獻:
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五年三班 石楷倫
當我在某一天的下午,我在圖書櫥的一個角落里,發現了楊紅櫻的《小白的選擇》,我借閱了這本書。當我周末津津有味的讀時,漸漸的,心里有了一個念頭——把所有的笑貓日記讀完。
當我要把這個念頭實現時,媽媽從旁邊走來,同意了我的這個巨大的念頭。媽媽并答應,下午陪我去買4本笑貓日記,我心里高興的沒法形容了。
當我買了前四本時,姐姐說給我帶全冊來。我的心更激動了。
自從姐姐把書拿來的時候,我便一天晚上讀一本。當我讀到《小貓出生在秘密洞》,我的眼睛淚汪汪的,優雅的虎皮貓好不容易生下小可憐,她卻在一股充滿寒冷的大風中,去了天堂。我真為笑貓和虎皮貓感到傷心啊。
我讀到《小貓出生在秘密山洞》的末段時,發現我和球球老老鼠一樣——喜歡調皮又可愛的三寶,他真的好聰明好可愛啊,不用教,就知道自救。更讓人驚奇的是,他居然是一只和笑貓一樣會微笑、狂笑、獰笑、冷笑、嘲笑、苦笑,還有皮笑肉不笑。我真希望也有只這樣的一家幸福的小貓。
現在才知道,原來貓的感情比人的多許多呢!他們還會給給杜真子和馬小跳拜年,真是太值得讓人喜歡這些小貓了。
真是誰也沒想到,我竟然在十幾個晚上把全冊的《笑貓日記》讀完了。我讀完最后一冊時,我迫不及待的等著名的作家——楊紅櫻,快把下一冊《笑貓日記》寫出來啊!我好渴望能讀到下一冊呀!
《笑貓日記》你是我最喜歡的“長生果”!!!
笑貓日記讀后感
青春散場,不小心遺落的碎片,扎傷的,不只是心。 我很愛看書,我喜歡在書海中暢游,在書海中探索奧妙。