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I'm Li Hua,the leader of the paper-cutting club in our school.l remember you were interested in Chinese traditional culture.now I'm glad to tell you there will be a Chinese paper-cutting exhibition which is held by our school.This is a good chance to have a full understanding about Chinese traditional culture.l really hope you can leave some time for the art feast.
The exhibition will take place in our school hall from 2 to 5 in the afternoon on June 21st. And the theme of the exhibition is "beauty of china".Not only our club 's works will be displayed,but also will we have a valuable set of paper-cutting which is created by a famous artist of this field.what's more,there will be a lot of interesting activities,from which you can know more about Chinese culture.
I would appreciate it if you could accept my invitation.l'm sure this exhibiting will leave you a wonderful impression!Looking forward to your reply.
Beat wishes!
【關(guān)鍵詞】 內(nèi)質(zhì)網(wǎng); 衣霉素; 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78; 凋亡促進(jìn)因子CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白; 小鼠
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum, ER)廣泛存在于真核細(xì)胞中,是蛋白質(zhì)合成、折疊、運(yùn)輸以及細(xì)胞內(nèi)鈣離子儲(chǔ)存的主要場(chǎng)所。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中鈣離子紊亂和未折疊蛋白質(zhì)蓄積可引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress, ERS),發(fā)生具有保護(hù)作用的未折疊蛋白反應(yīng)(unfolded protein response, UPR)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激直接影響應(yīng)激細(xì)胞的轉(zhuǎn)歸,如修復(fù)、損傷或凋亡。神經(jīng)系統(tǒng)許多疾病與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)。最近的研究表明,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的凋亡信號(hào)傳導(dǎo)途徑可能與阿爾茨海默病(Alzheimer disease, AD)的發(fā)病有關(guān)。本研究觀察滋補(bǔ)脾陰方藥(Zibu Piyin Recipe, ZBPYR)含藥血清對(duì)由N糖鏈抑制劑衣霉素(tunicamycin, Tm)引起的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響,以探討其神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)藥物 滋補(bǔ)脾陰方藥由清代吳澄《不居集》中資成湯加味而成,由紅參30 g,山藥15 g,茯苓15 g,白芍15 g,丹參12 g,白扁豆15 g,蓮肉20 g,石菖蒲10 g,遠(yuǎn)志10 g,檀香4.5 g,橘紅9 g,甘草9 g組成,均購(gòu)自大連醫(yī)藥集團(tuán)藥材公司。中藥常規(guī)水煎,每毫升中藥液含生藥3.29 g,4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2 主要試劑和儀器 達(dá)爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基(Dulbecco's modified eagle's medium, DMEM)和胎牛血清,Gibco公司產(chǎn)品;胰蛋白酶和TRIReagent,Sigma公司產(chǎn)品;Tm,星形孢菌素(staurosporine, STS),日本W(wǎng)ako公司產(chǎn)品;細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒,Roche公司產(chǎn)品;RNase OUT和Oligo (dt),Invitrogen公司產(chǎn)品。二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱,Thermo Forma公司產(chǎn)品;臺(tái)式高速冷凍離心機(jī),Sigma公司產(chǎn)品;UV754紫外分光光度計(jì),上海分析儀器總廠(chǎng)產(chǎn)品;溫度梯度PCR擴(kuò)增儀,Thermo Hybaid公司產(chǎn)品;酶標(biāo)儀,美國(guó)BIOTEKTM公司產(chǎn)品;凝膠成像分析系統(tǒng),UVP公司產(chǎn)品。
1.3 中藥血清制備 取健康雄性SD大鼠(220~250 g)12只,隨機(jī)分為對(duì)照組和ZBPYR組,每組6只。適應(yīng)飼養(yǎng)3 d后,ZBPYR組給予滋補(bǔ)脾陰方藥灌胃,10 ml/kg體質(zhì)量,此劑量灌胃2次/d,連續(xù)3 d;對(duì)照組給予等體積生理鹽水灌胃。于末次給藥后1 h腹主動(dòng)脈取血,靜置2 h,2 000 r/min,4 ℃離心15 min分離血清,離心半徑為16.1 cm,56 ℃,30 min滅活。0.22 μm濾膜過(guò)濾除菌,-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.4 Neuro2a細(xì)胞的培養(yǎng) 小鼠神經(jīng)瘤母細(xì)胞Neuro2a細(xì)胞株由日本北海道大學(xué)藥學(xué)部野村靖幸教授惠贈(zèng)。細(xì)胞常規(guī)復(fù)蘇后加入培養(yǎng)液于5% CO2、37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。細(xì)胞單層長(zhǎng)滿(mǎn)后用終濃度為0.25%胰蛋白酶37 ℃條件下消化3 min,以1∶3傳代。培養(yǎng)液含90% DMEM、10%胎牛血清和1%雙抗。細(xì)胞長(zhǎng)至第三代可以使用。
1.5 乳酸脫氫酶釋放試驗(yàn) Neuro2a細(xì)胞接種后分為對(duì)照組、10%空白血清組、5%ZBPYR組、10%ZBPYR組、15%ZBPYR組、Tm(5 μg/ml)組、10%空白血清+Tm(5 μg/ml)組、5% ZBPYR+Tm(5 μg/ml)組、10% ZBPYR+Tm(5 μg/ml)組、15% ZBPYR+Tm(5 μg/ml)組。細(xì)胞單層長(zhǎng)至70%時(shí)按以上分組給予相應(yīng)刺激。刺激后細(xì)胞放入5%CO2、37℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)48 h后用乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase, LDH)釋放試驗(yàn)檢測(cè)LDH泄漏率。LDH實(shí)驗(yàn)步驟按試劑盒說(shuō)明執(zhí)行。LDH泄漏率為細(xì)胞上清中LDH活性與細(xì)胞總的LDH活性比值。LDH活性測(cè)定用酶標(biāo)儀于490 nm處檢測(cè)。另外Neuro2a細(xì)胞接種后分為對(duì)照組、STS(0.1 μmol/L)組、10%空白血清+STS(0.1 μmol/L)組、15% ZBPYR+STS(0.1 μmol/L)組,待細(xì)胞單層長(zhǎng)至70%時(shí)按以上分組給予相應(yīng)刺激。刺激后細(xì)胞放入5% CO2、37 ℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)48 h后檢測(cè)LDH泄漏率。
1.6 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 實(shí)驗(yàn)分組同前。細(xì)胞單層長(zhǎng)至90%時(shí)按以上分組給予相應(yīng)刺激。細(xì)胞放入5% CO2、37 ℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)6 h。總RNA的提取和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。(1)收集細(xì)胞用TRIReagent提取總RNA。用紫外分光光度計(jì)測(cè)定A260/A280,計(jì)算RNA濃度。(2)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。反應(yīng)體系為20 μl。取2 μg總RNA,加二乙基焦磷酰胺(diethyl pyrocarbonate, DEPC)水至總體積為9 μl,加0.5 μl Oligo (dt) 1218引物混合后,置70 ℃變性10 min。然后加入下列成分:5×第一鏈緩沖液5.875 μl、10 mmol/L dNTP 2 μl、0.1 mol/L DTT 2 μl、RNase抑制劑0.5 μl和逆轉(zhuǎn)錄酶0.125 μl,混合使反應(yīng)總體系為20 μl。放入46 ℃反應(yīng)1.5 h,70 ℃變性15 min,冰上5 min后進(jìn)行擴(kuò)增。(3)PCR反應(yīng)。在0.2 ml PCR管中加入1.2 μl逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、sd H2O 9 μl、10 mmol/L dNTP 0.24 μl、10×PCR緩沖液1.2 μl、聚合酶0.12 μl、上游引物(20 μmol/L)0.12 μl、下游引物(20 μmol/L)0.12 μl,總反應(yīng)體系為12 μl。(4)PCR產(chǎn)物觀察。PCR產(chǎn)物經(jīng)40%丙烯酰胺凝膠電泳后,EB染色15 min,用凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行拍照及圖像分析,然后計(jì)算待測(cè)基因與內(nèi)標(biāo)磷酸甘油醛脫氫酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase, GAPDH)吸光度的比值。PCR反應(yīng)擴(kuò)增參數(shù)如下:葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose regulated protein 78, GRP78),94 ℃ 5 min,94 ℃ 1 min,55 ℃ 1 min,72 ℃ 1 min,循環(huán)22圈,72 ℃ 5 min;凋亡促進(jìn)因子CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白(CCAAT/EBP homologous protein, CHOP),94 ℃ 5 min,94 ℃ 1 min,60 ℃ 1 min,72 ℃ 1 min,循環(huán)25圈,72 ℃ 5 min;GAPDH,94 ℃ 5 min,94 ℃ 40 s,58 ℃ 30 s,72 ℃ 40 s,循環(huán)28圈,72 ℃ 5 min。引物序列見(jiàn)表1。
表1 引物序列(略)
Table 1 Sequence of the primers
1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)4次,圖像分析采用LabWorks 4.6專(zhuān)業(yè)圖像分析軟件。數(shù)據(jù)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行分析,兩組間差異比較采用t檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
2.1 LDH釋放試驗(yàn)檢測(cè)ZBPYR含藥血清對(duì)Tm刺激Neuro2a后LDH泄漏率的影響 各濃度含藥血清和10%空白血清組與對(duì)照組相比,LDH泄漏率差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明血清對(duì)Neuro2a細(xì)胞沒(méi)有毒性作用;Tm(5 μg/ml)組與對(duì)照組相比,LDH泄漏率明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);10%空白血清預(yù)處理組LDH泄漏率與Tm組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而各濃度ZBPYR含藥血清預(yù)處理組與Tm組相比,LDH泄漏率下降明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。10%藥物血清預(yù)處理組與10%空白血清預(yù)處理組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖1。
2.2 RTPCR方法觀察ZBPYR含藥血清對(duì)Tm刺激Neuro2a后GRP78 mRNA表達(dá)的影響 各濃度含藥血清和10%空白血清組與對(duì)照組相比,GRP78 mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明血清對(duì)Neuro2a細(xì)胞GRP78 mRNA表達(dá)沒(méi)有影響;Tm(5 μg/ml)組與對(duì)照組相比,GRP78 mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)(P<0.05);而加入血清預(yù)處理1 h后再加入濃度為5 μg/ml Tm各組與Tm(5 μg/ml)組相比,GRP78 mRNA表達(dá)明顯下降(P<0.05),其中ZBPYR含藥血清預(yù)處理組GRP78 mRNA表達(dá)較空白血清預(yù)處理組GRP78 mRNA表達(dá)下降更加明顯(P<0.05)。見(jiàn)圖2。
2.3 RTPCR方法觀察ZBPYR含藥血清對(duì)Tm刺激Neuro2a后CHOP mRNA表達(dá)的影響 各濃度含藥血清組與對(duì)照組相比,CHOP mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明血清對(duì)Neuro2a細(xì)胞CHOP mRNA表達(dá)沒(méi)有影響;Tm(5 μg/ml)組與對(duì)照組相比,CHOP mRNA表達(dá)增強(qiáng)(P<0.05);10%空白血清預(yù)處理組與Tm(5 μg/ml)組相比,CHOP mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而各濃度ZBPYR含藥血清預(yù)處理組CHOP mRNA表達(dá)與Tm(5 μg/ml)組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);10%藥物血清預(yù)處理組與10%空白血清預(yù)處理組相比,CHOP mRNA表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖2。
圖1 LDH檢測(cè)Tm刺激細(xì)胞后各組細(xì)胞LDH泄漏率(略)
Figure 1 LDH leakage from each group treated by Tm
**P<0.01, vs normal control group; P<0.05, P<0.01, vs Tmtreated group; P<0.05, vs 10% control serumtreated group (n=4 for each group).
圖2 RTPCR法觀察Tm刺激各組細(xì)胞后GRP78和CHOP mRNA表達(dá)(略)
Figure 2 Expressions of GRP78 and CHOP mRNAs in different groups treated by Tm (RTPCR)
Results of RTPCR electrophoresis from each group and values of IOD from each group (n=4 for each group). *P<0.05, vs normal control group; P<0.05, vs Tmtreated group; P<0.05, vs 10% control serumtreated group.
2.4 LDH釋放試驗(yàn)檢測(cè)STS刺激Neuro2a后LDH泄漏率的變化 STS 0.1 μmol/L組與對(duì)照組比,LDH泄漏率升高(P<0.01);而加入15%空白血清預(yù)處理組與STS組相比,LDH泄漏率下降(P<0.05);15% ZBPYR含藥血清預(yù)處理組與STS組相比,LDH泄漏率下降(P<0.01);15% ZBPYR含藥血清預(yù)處理組與15%空白血清預(yù)處理組相比LDH泄漏率下降更加明顯(P<0.05)。見(jiàn)圖3。
圖3 LDH檢測(cè)STS刺激細(xì)胞后各組細(xì)胞LDH泄漏率(略)
Figure 3 LDH leakage from each group treated by STS
**P<0.01, vs normal control group; P<0.05, P<0.01, vs STStreated group; P<0.05, vs 15% control serumtreated group (n=4 for each group).
3 討論
ERS是細(xì)胞的一種應(yīng)激反應(yīng)過(guò)程,糖饑餓、鈣平衡紊亂、糖基化抑制和二硫鍵合成減少等情況下,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的微環(huán)境發(fā)生改變,蛋白質(zhì)的折疊受到影響,導(dǎo)致大量未折疊或錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)堆積于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi),由此引起一系列以分子伴侶和折疊酶表達(dá)上調(diào)為標(biāo)志的應(yīng)答反應(yīng),稱(chēng)為未折疊蛋白反應(yīng)(unfolded protein response, UPR)。通過(guò)UPR細(xì)胞才能在應(yīng)激情況下存活。分子伴侶GRP78與凋亡促進(jìn)因子CHOP是ERS時(shí)表達(dá)增多的兩種分子,被看作是ERS的標(biāo)志,在ERS中起著不同的作用。其中GRP78能保護(hù)細(xì)胞,而CHOP則是促進(jìn)細(xì)胞凋亡。因此通過(guò)藥物干預(yù)后研究它們的表達(dá)情況可以進(jìn)一步了解藥物對(duì)ERS的作用。AD是一種常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病,病理特征為淀粉樣蛋白的沉積、神經(jīng)原纖維纏結(jié)、tau蛋白異常磷酸化和區(qū)域選擇性神經(jīng)元死亡[1]。AD與基因突變有關(guān),主要有編碼淀粉樣蛋白前體基因(amyloid protein precursor, APP)和早老素(presenilin, PS)基因,這些基因都與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)。AD相關(guān)的早老素突變,誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)并且通過(guò)改變APP的蛋白水解加工作用而部分地增強(qiáng)對(duì)應(yīng)激誘導(dǎo)的凋亡的易損性。PS1突變通過(guò)細(xì)胞表面有活性的鈣離子流入的直接減少,不依賴(lài)APP,并間接地通過(guò)APP處理作用和淀粉樣肽的產(chǎn)生增加內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子釋放來(lái)解除對(duì)神經(jīng)元鈣離子穩(wěn)態(tài)的控制。這種鈣離子穩(wěn)態(tài)的干擾將改變APP的加工,過(guò)量生成β淀粉樣蛋白142(amyloid βprotein 142, Aβ142),同時(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣失衡,激活鈣蛋白激酶,切割內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的caspase12,從而激活caspase12介導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特異性凋亡路徑,最終形成AD的病理變化[2]。除了鈣離子失調(diào),PS突變下調(diào)UPR并增強(qiáng)對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的易損性[3]。PS1突變還誘導(dǎo)了一個(gè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中與應(yīng)激介導(dǎo)的凋亡途徑有關(guān)的凋亡前因子CHOP的表達(dá)[4]。PS是γ分泌酶復(fù)合物的一部分,與β分泌酶一起,裂解APP產(chǎn)生Aβ,并且PS突變?cè)黾涌侫β和Aβ142的產(chǎn)生。Aβ能直接引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣離子釋放并且誘導(dǎo)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和神經(jīng)毒性[5]。因而,在AD中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是引發(fā)和調(diào)節(jié)神經(jīng)元死亡的一個(gè)主要事件。現(xiàn)有研究顯示在AD神經(jīng)元死亡中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑和線(xiàn)粒體損傷的凋亡途徑相互影響,起著調(diào)控凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)的作用[6]。中醫(yī)認(rèn)為人體的生長(zhǎng)、發(fā)育和衰老與“腎”密切相關(guān)。“腎精虛衰”是衰老的主要原因。同時(shí)又認(rèn)為“脾胃為血?dú)怅庩?yáng)之根蒂”,“脾胃既和,其人壽;脾胃不和,其人夭”,因此也重視奉養(yǎng)脾胃精氣在延年中的作用[7]。老年癡呆發(fā)病于老年期。老年期脾胃氣衰,飲食減少,脾虛則化源不足,腦髓失養(yǎng),神機(jī)失調(diào)而發(fā)為本病。因此脾虛是老年性癡呆的基本病機(jī),脾的功能衰退在老年性癡呆發(fā)病過(guò)程中起著主導(dǎo)作用,并貫穿于全過(guò)程[8]。脾的生理功能是脾之陰陽(yáng)共同作用的結(jié)果。脾陰是指存在于脾臟的陰液(包括血、津液和水谷精微等)和脾的物質(zhì)形態(tài)及其滋潤(rùn)濡養(yǎng)功能。由于脾與大腦關(guān)系密切,脾陰虧虛嚴(yán)重影響大腦的意識(shí)、學(xué)習(xí)、思維、記憶和情緒等功能,導(dǎo)致一系列與腦相關(guān)的精神意識(shí)病證如意識(shí)不清、學(xué)習(xí)記憶能力下降和情緒失常等。因此,滋補(bǔ)脾陰應(yīng)當(dāng)是防治老年癡呆的一個(gè)重要措施。滋補(bǔ)脾陰方藥由清代吳澄《不居集》中資成湯加味而成,以人參補(bǔ)脾益氣生津,山藥益胃補(bǔ)脾養(yǎng)陰,白芍養(yǎng)陰緩急,丹參活血養(yǎng)血益陰,茯苓健脾安神益智等,共奏健脾益陰之效。本組以往的研究顯示,滋補(bǔ)脾陰方藥能通過(guò)改善老齡大鼠腦細(xì)胞線(xiàn)粒體膜Na+K+ATP酶、Ca2+Mg2+ATP酶活性,調(diào)節(jié)膜磷脂代謝障礙和修飾膜的作用[9],以及延緩興奮性氨基酸受體N甲基D門(mén)冬氨酸(NmethylDaspartic acid, NMDA)受體、γ氨基丁酸(gammaaminobutyric acid, GABA)受體染色陽(yáng)性神經(jīng)元在衰老過(guò)程中喪失,同時(shí)抑制神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)的表達(dá),起到神經(jīng)保護(hù)、延緩腦衰老的作用[10]。本實(shí)驗(yàn)中Tm刺激Neuro2a細(xì)胞LDH釋放試驗(yàn)結(jié)果表明,在加入滋補(bǔ)脾陰方藥含藥血清預(yù)保護(hù)后,可以明顯降低Tm刺激細(xì)胞后的LDH泄漏率,結(jié)合RTPCR觀察到滋補(bǔ)脾陰方藥含藥血清預(yù)處理后,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志物GRP78及CHOP mRNA的表達(dá)受到抑制,兩種實(shí)驗(yàn)結(jié)果的同步性可以推斷滋補(bǔ)脾陰方藥具有抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的作用。STS刺激Neuro2a細(xì)胞LDH釋放試驗(yàn)結(jié)果表明,加入滋補(bǔ)脾陰方藥含藥血清預(yù)處理后,可以明顯降低STS刺激細(xì)胞后的LDH泄漏率(STS是線(xiàn)粒體凋亡途徑誘導(dǎo)劑)。因而表明滋補(bǔ)脾陰方藥同時(shí)具有保護(hù)線(xiàn)粒體損傷的作用。以上的研究結(jié)果為滋補(bǔ)脾陰方藥應(yīng)用于臨床防治AD提供了依據(jù)。AD是一種常見(jiàn)的神經(jīng)退行性病變,其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,目前尚無(wú)有效的治療手段,對(duì)社會(huì)和人們的生活造成嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)。現(xiàn)有的研究表明,神經(jīng)元的凋亡在AD的發(fā)病過(guò)程中起著重要的作用。而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑和線(xiàn)粒體損傷的凋亡途徑已被證明在AD的發(fā)病過(guò)程中起著協(xié)同作用。我們的實(shí)驗(yàn)證明,滋補(bǔ)脾陰方藥對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑和線(xiàn)粒體損傷的凋亡途徑具有雙重作用,因而有助于AD的防治,加之中藥治療有著毒副作用低、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的優(yōu)點(diǎn),更易于為人們所接受。
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7 Li ZP, Zhao WK, Xu PC, et al. Effects of recipes for replenishing qi and activating blood on senescence related gene expressions in the liver of aging rats. Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao. 2005; 3(5): 370373. Chinese with abstract in English.
黎志萍, 趙偉康, 徐品初, 等. 益氣活血方藥對(duì)老年大鼠肝臟衰老相關(guān)基因表達(dá)的影響. 中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào). 2005; 3(5): 370373.
8 Zhao WY, Chen R. Applying treatment to senile dementia based on differentiation of spleen syndrome. Zhong Yi Yao Xue Kan. 2005; 23 (9): 16651666. Chinese.
趙文研, 陳榮. 從脾論治老年性癡呆癥. 中醫(yī)藥學(xué)刊. 2005; 23(9): 16651666.
9 Zhan LB, Xu F, Dong YK, et al. Effect of the prescription nourishing the Piyin (PNPY) on the brain mitochria menbrane ATPase activity of senile rats. Zhong Yao Yao Li Yu Lin Chuang. 2000; 16(1): 2425. Chinese with abstract in English.
關(guān)鍵詞:任務(wù)情境;創(chuàng)設(shè)原則;探究學(xué)習(xí)
在任務(wù)驅(qū)動(dòng)教學(xué)法中,任務(wù)設(shè)計(jì)是核心,圍繞著任務(wù)而創(chuàng)設(shè)的情境是有效實(shí)施任務(wù)驅(qū)動(dòng)的基礎(chǔ)。文章以計(jì)算機(jī)基礎(chǔ)教學(xué)為例,對(duì)任務(wù)情境創(chuàng)設(shè)進(jìn)行探討。
任務(wù)情境創(chuàng)設(shè)的原則
任務(wù)驅(qū)動(dòng)教學(xué)的展開(kāi),起始于有效任務(wù)情境的設(shè)計(jì)。任務(wù)驅(qū)動(dòng)式教學(xué)必須依賴(lài)于恰當(dāng)?shù)娜蝿?wù)情境才能調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性,主動(dòng)參與到任務(wù)的確立、分析等活動(dòng)中,才能充分發(fā)揮學(xué)生的主體性,實(shí)現(xiàn)學(xué)生意義的建構(gòu)。要?jiǎng)?chuàng)設(shè)理想的任務(wù)情境,我們應(yīng)遵循以下幾個(gè)原則。
1.目標(biāo)性原則
任務(wù)情境與教學(xué)目標(biāo)相聯(lián)系。先選擇典型的教學(xué)內(nèi)容,然后根據(jù)教學(xué)目標(biāo)創(chuàng)設(shè)任務(wù)情境。
2.貼近生活原則
任務(wù)情境與現(xiàn)實(shí)生活相適應(yīng)。教師所創(chuàng)設(shè)的任務(wù)情境要適應(yīng)學(xué)生真實(shí)的生活環(huán)境,結(jié)合學(xué)生日常熟悉的生活情境,加強(qiáng)學(xué)習(xí)內(nèi)容與生活的聯(lián)系,調(diào)動(dòng)學(xué)生主體性的積極發(fā)揮。
如創(chuàng)設(shè)“撰寫(xiě)競(jìng)選自薦信”、“制作個(gè)人簡(jiǎn)歷”、“分析班級(jí)學(xué)期成績(jī)”及 “學(xué)校形象宣傳”等情境。
3. 貼近專(zhuān)業(yè)原則
任務(wù)情境與學(xué)生所學(xué)專(zhuān)業(yè)相適應(yīng)。教師所創(chuàng)設(shè)的任務(wù)情境要適應(yīng)學(xué)生所學(xué)的專(zhuān)業(yè),關(guān)注行業(yè),結(jié)合專(zhuān)業(yè)。 如 “制作動(dòng)漫節(jié)邀請(qǐng)函”等任務(wù)情境。
4. 學(xué)生主體性原則
任務(wù)情境與學(xué)生已有知識(shí)經(jīng)驗(yàn)相聯(lián)系。從學(xué)生已有的知識(shí)結(jié)構(gòu)出發(fā),把情境置于學(xué)生的最近發(fā)展區(qū),使知識(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程形成階梯式的上升過(guò)程。如,創(chuàng)設(shè)“制作宣傳手冊(cè)”、“企業(yè)產(chǎn)品推介”等任務(wù)情境。
任務(wù)情境創(chuàng)設(shè)的步驟
貼近學(xué)生學(xué)習(xí)、生活及將來(lái)就業(yè)的場(chǎng)景進(jìn)行情境創(chuàng)設(shè)。以“制作校園動(dòng)漫節(jié)邀請(qǐng)函”任務(wù)為例,任務(wù)情境的創(chuàng)設(shè)步驟如下:
1.根據(jù)學(xué)習(xí)目標(biāo),分析任務(wù)內(nèi)容
本單元的學(xué)習(xí)目標(biāo)主要為郵件合并、頁(yè)眉頁(yè)腳設(shè)置、項(xiàng)目符號(hào)與編號(hào)設(shè)置。學(xué)習(xí)目標(biāo)的重點(diǎn)難點(diǎn)是郵件合并,郵件合并的主要功能是生成批量文檔。任務(wù)定位為批量文檔的生成。
2.結(jié)合學(xué)生生活(或?qū)I(yè)), 分析任務(wù)形式
筆者所教班級(jí)專(zhuān)業(yè)為動(dòng)漫專(zhuān)業(yè),結(jié)合專(zhuān)業(yè)活動(dòng),將任務(wù)定位為“校園動(dòng)漫節(jié)邀請(qǐng)函”。
3.結(jié)合已有知識(shí),確定任務(wù)具體要求
學(xué)校將舉辦校園動(dòng)漫節(jié),現(xiàn)需要制作一批動(dòng)漫節(jié)邀請(qǐng)函,并郵遞分發(fā)。
任務(wù)情境在教學(xué)實(shí)施中的效果
以制作校園動(dòng)漫節(jié)邀請(qǐng)函為例。任務(wù)情境在教學(xué)實(shí)施中起到顯著的效果。
1.調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)積極性
此任務(wù)情境把學(xué)生帶入真實(shí)場(chǎng)景。學(xué)生在教學(xué)過(guò)程中發(fā)揮主動(dòng)性,以主人翁的身份,體驗(yàn)完整的工作過(guò)程――“資訊―計(jì)劃―決策―實(shí)施―檢查―評(píng)估”。首先,在老師的指導(dǎo)下,討論分析制作邀請(qǐng)函的格式和要求,明確任務(wù);其次,完成任務(wù);最后,通過(guò)檢查評(píng)估,修改完善作品。
2. 自主探究,培養(yǎng)學(xué)習(xí)能力
任務(wù)實(shí)施階段分為兩大階段,第一階段,因?qū)W生已具備一定的文檔編輯和格式設(shè)置能力,在原有知識(shí)的基礎(chǔ)上,通過(guò)自學(xué)及小組討論完成表-1中子任務(wù)(1)――制作邀請(qǐng)函文檔和子任務(wù)(3)――制作邀請(qǐng)函封面。第二階段,是新知識(shí)的學(xué)習(xí)。學(xué)生通過(guò)看書(shū)、查看教學(xué)視頻等學(xué)習(xí)資源,小組討論、自主探究郵件合并等知識(shí)技能,完成子任務(wù)(2) ――通過(guò)郵件合并生成批量邀請(qǐng)函及子任務(wù) (4) ――制作一批信封標(biāo)簽。培養(yǎng)了學(xué)生的探索和自學(xué)能力。
3.真正發(fā)揮學(xué)生在學(xué)習(xí)活動(dòng)中的主動(dòng)性
會(huì)議邀請(qǐng)函的格式
1.標(biāo)題。由會(huì)議名稱(chēng)和邀請(qǐng)函(書(shū))組成,一般可不寫(xiě)主辦機(jī)關(guān)名稱(chēng)和關(guān)于舉辦的字樣,如:《亞太城市信息化高級(jí)論壇邀請(qǐng)函》。邀請(qǐng)函三字是完整的文種名稱(chēng),與公文中的函是兩種不同的文種,因此不宜拆開(kāi)寫(xiě)成關(guān)于邀請(qǐng)出席會(huì)議的函
2.稱(chēng)呼。邀請(qǐng)函的發(fā)送對(duì)象有三類(lèi)情況:
(1)發(fā)送到單位的邀請(qǐng)函,應(yīng)當(dāng)寫(xiě)單位名稱(chēng)。由于邀請(qǐng)函是一種禮儀性文書(shū),稱(chēng)呼中要用單稱(chēng)的寫(xiě)法,不宜用泛稱(chēng)(統(tǒng)稱(chēng)),以示禮貌和尊重。
(2)邀請(qǐng)函直接發(fā)給個(gè)人的,應(yīng)當(dāng)寫(xiě)個(gè)人姓名,前冠尊敬的敬語(yǔ)詞,后綴先生、女士、同志等。
(3)網(wǎng)上或報(bào)刊上公開(kāi)的邀請(qǐng)函,由于對(duì)象不確定,可省略稱(chēng)呼,或以敬啟者統(tǒng)稱(chēng)。
3.正文。正文應(yīng)逐項(xiàng)載明具體內(nèi)容。開(kāi)頭部分寫(xiě)明舉辦會(huì)議的背景和目的,用特邀請(qǐng)您出席(列席)照應(yīng)稱(chēng)呼,再用過(guò)渡句轉(zhuǎn)入下文;主體部分可采用序號(hào)加小標(biāo)題的形式寫(xiě)明具體事項(xiàng);最后寫(xiě)明聯(lián)系聯(lián)絡(luò)信息和聯(lián)絡(luò)方式。結(jié)尾處也可寫(xiě)此致,再換行頂格寫(xiě)敬禮,亦可省略。
4.落款。因邀請(qǐng)函的標(biāo)題一般不標(biāo)注主辦單位名稱(chēng),因此落款處應(yīng)當(dāng)署主辦單位名稱(chēng)并蓋章。
5.成文時(shí)間。寫(xiě)明具體的年、月、日。
會(huì)議邀請(qǐng)函的范文
【范文1】
客戶(hù)會(huì)議邀請(qǐng)函
20XX年在愉快的合作中結(jié)束了。我們深知庚辰集團(tuán)在發(fā)展的道路上離不開(kāi)您的合作與支持。久久聯(lián)合、歲歲相長(zhǎng)。在此誠(chéng)摯邀請(qǐng)您參加庚辰集團(tuán)舉辦的客戶(hù)交流會(huì),屆時(shí)濱州各行業(yè)的優(yōu)秀企業(yè)代表將與您共話(huà)友情、共謀發(fā)展,總結(jié)20XX、規(guī)劃20XX。
如蒙應(yīng)允、不勝欣喜!
地點(diǎn):濱州大飯店二樓東海廳
時(shí)間:20XX年1月22日(本周五)下午4點(diǎn)到8點(diǎn)
全程免費(fèi)。
聯(lián)系電話(huà):
溫馨提示:本交流會(huì)有抽獎(jiǎng)環(huán)節(jié),如有企業(yè)展示和宣傳產(chǎn)品的,及時(shí)與工作人員聯(lián)系。
【范文2】
________________研討會(huì)邀請(qǐng)函
尊敬的 ____________:
您好!
____________研討會(huì)定于20________年____月________日________日在________________召開(kāi),誠(chéng)摯邀請(qǐng)您參會(huì)。會(huì)議的有關(guān)事宜如下:
一、會(huì)議主題 ________
二、主要論題 1.________面臨的形勢(shì)與任務(wù)
2.________建設(shè)與________的完善
3.________的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)
4.________隊(duì)伍建設(shè)的主要措施與途徑 5.________定位 6.________等________問(wèn)題 7.當(dāng)前________的熱點(diǎn)問(wèn)題 8.____________相關(guān)________問(wèn)題 三、投稿要求
本屆________研討會(huì),接收與上述專(zhuān)題相關(guān)的、未公開(kāi)發(fā)表的論文與研究報(bào)告。
1. 投稿內(nèi)容與格式
論文格式包括標(biāo)題、作者基本信息、摘要、關(guān)鍵詞、正文、注釋、參考文獻(xiàn)幾個(gè)部分。摘要字?jǐn)?shù)在200-300字之間,且關(guān)鍵詞最多不能超過(guò)4個(gè)。論文正文總字?jǐn)?shù)應(yīng)不少于5000字,中文使用宋體、小四號(hào)字、1.5倍行距排版;含頁(yè)眉和腳注在內(nèi),頁(yè)邊距設(shè)為2.5厘米。
提交的文章中凡采用他人原文或觀點(diǎn),務(wù)必加注說(shuō)明。在引文后加括號(hào)注明作者、出版年份及頁(yè)碼,或者直接將引用以腳注方式標(biāo)識(shí)清楚。詳細(xì)文獻(xiàn)出處作為參考文獻(xiàn)列于文后,以作者、出版年份、書(shū)(或文章)名、出版單位(或期刊名)、出版地點(diǎn)排序。文獻(xiàn)按作者姓氏的第一個(gè)字母依A-Z順序分中、英文兩部分排列,中文文獻(xiàn)在前,英文文獻(xiàn)在后。引文中的英文部分,專(zhuān)著名用斜體,論文題目寫(xiě)入 號(hào)內(nèi)。作者自己的說(shuō)明放在當(dāng)頁(yè)腳注。
2. 投稿電子郵箱
互聯(lián)網(wǎng)會(huì)議PPT資料大全 技術(shù)大會(huì) 產(chǎn)品經(jīng)理大會(huì) 網(wǎng)絡(luò)營(yíng)銷(xiāo)大會(huì) 交互體驗(yàn)大會(huì)
Email:____________@____________(請(qǐng)?jiān)卩]件主題標(biāo)明:____________研討會(huì))
3. 論文收錄
研討會(huì)籌備委員會(huì)將會(huì)收錄您的投稿,并將制作論文集, 如有PPT文件,請(qǐng)一并發(fā)送至投稿電子郵箱并注明:____________研討會(huì)PPT。
4. 投稿截止日期
本次會(huì)議投稿截止日期為20________年____月____日。 四、研討會(huì)時(shí)間及地點(diǎn)
會(huì)議時(shí)間:20________年____月________日?qǐng)?bào)到,________月________日會(huì)議,________日考察。 住宿地點(diǎn):________大酒店(________高速公路________出口____行________米路____) 會(huì)議地點(diǎn):____________________
【范文3】
國(guó)際會(huì)議邀請(qǐng)函
Dear Prof. Wang Jianxing,
The Tenth Enhancement and Promotion of Computational Methods in Engineering and Science International Conference is going to be held from August 21 to 23, 2006 in Sanya, Hainan Island of China. On behalf of the Organizing Committee we have the honor and pleasure of extending to you the invitation to give an oral presentation entitled
Research on Thermo Quality Transmission Problems for Large-Scale Slab of With Creep
The time for your presentation is 20 minutes including 3 minutes discussion. The full-length paper should be submitted to the Conference Secretariat General, Prof. Yao Zhenhan by May 1 of 2006. The abstract and the full-length manuscript of your paper will be included in the printed and CD-ROM Conference Proceedings,respectively. The format for the full-length paper is available on the Conference web site:XXX
Equipments prepared by the conference for your presentation should be (1) Microsoft PowerPoint software and (2) multimedia projector connected to portable notebook computer. You may just bring a storage media with USB connection.
We thank you very much in advance for your contribution to the success of the Conference.
Please contact Prof. Mingwu Yuan, by (E-mail) or +8610 62751826 (Phone) and +8610 62759806 (Fax), for anything not clearly defined.
This invitation letter will be sent to you by E-mail first and then by regular post mail.
I am looking forward to hearing from you.
Best regards,
Mingwu Yuan,
關(guān)于中秋慶典的邀請(qǐng)函(一)
中秋慶典邀請(qǐng)函
皎皎秋空八月圓,常娥端正桂枝鮮
20xx靈犀彩苑中秋慶典
金黃的陽(yáng)光,告訴我秋天到了,取一縷溫暖,織進(jìn)我們的心里;
橙黃的落葉,告訴我秋天到了,拾一抹彩色,織進(jìn)我們的記憶里;
瓜果的飄香,告訴我秋天到了,摘一串葡萄,讓甜泌入我們的心里;
八月的秋空,嬋娟圓,齊邀家人共團(tuán)圓。
慶典時(shí)間及流程
慶典時(shí)間:9月12日 星期四
邀請(qǐng)家庭:在園家庭及準(zhǔn)備入園家庭
報(bào)名方式:校趣通群內(nèi)接龍
慶典流程:
16: 00-16: 15 晨圈 {co-we}
16:15-17:35 茶歇 {co-we}
16:35-17:35 親子手工~蠟燭燈籠 {co-we}
17:35-17:45 皮影戲 {彩虹班}
17:45-19:30 餐會(huì)+二手小市集+摸秋+猜燈謎+制作酵素 {小后山}
19:30-20:00 賞月+游園 {小后山 湖邊}
注 意 事 項(xiàng)
1、【著裝】良辰美景,建議家長(zhǎng)為孩子及自己準(zhǔn)備漢服、裙裝或傳統(tǒng)服裝,讓我們成為一道美麗的風(fēng)景線(xiàn)。
2、【自帶食物聚餐】請(qǐng)大家視情況自備1-2樣您家的拿手小菜,請(qǐng)自備餐具、水杯。食物、餐具、制作酵素使用的瓶子、小市集上使用的物品,請(qǐng)于慶典活動(dòng)開(kāi)始前送到小后山 (小后山有專(zhuān)職人員在場(chǎng))。
3、【手工材料準(zhǔn)備】
**手工蠟燭燈籠:請(qǐng)家長(zhǎng)為孩子準(zhǔn)備一至兩個(gè)干凈、透明的寬口玻璃瓶,在慶典當(dāng)天帶到二樓co-we,制作手工燈籠使用。
**制作酵素:準(zhǔn)備大瓶子一個(gè),以制作酵素使用,請(qǐng)?jiān)趹c典活動(dòng)開(kāi)始前帶到小后山。
**參加以物易物小市集的家長(zhǎng)可以準(zhǔn)備2-3樣孩子愿意分享交換的家中物件或手工玩具,我們會(huì)準(zhǔn)備交換區(qū),給孩子以物易物;小物品請(qǐng)?jiān)趹c典開(kāi)始前帶到小后山。
4、【時(shí)間】愿我們擁有從容有序的節(jié)律,請(qǐng)于活動(dòng)開(kāi)始前10分鐘(15點(diǎn)50分)乘坐電梯到達(dá)二樓co-we集合。
5、【防蚊】活動(dòng)全程安排緊湊,還請(qǐng)照顧好您的孩子,并注意防蚊防蟲(chóng)。
關(guān)于中秋慶典的邀請(qǐng)函(二)
所有的生命過(guò)程都是有節(jié)奏的從大宇宙中星體的節(jié)奏,季節(jié)更替,小鳥(niǎo)筑巢或遷徙,晝夜交替,到人類(lèi)各個(gè)心臟跳動(dòng),呼吸和脈動(dòng)的節(jié)奏。我們存在于各種節(jié)奏中,我們的幸福大體上取決于我們能將節(jié)奏的原則融入我們的生活中。
我們迎來(lái)又一年的中秋節(jié),每一個(gè)傳統(tǒng)節(jié)日都有著眾多的傳說(shuō)故事,獨(dú)特的慶祝方式,深厚的歷史淵源。不同的節(jié)日帶給我們不同的精神和啟示,這使傳統(tǒng)節(jié)日成為人們?nèi)諒?fù)一日,年復(fù)一年的希望和向往,文化和精神緊密連接在一起,將有著同一傳統(tǒng)的人緊密凝聚在一起,共同走入傳統(tǒng)節(jié)日,感受傳統(tǒng)文化的魅力。
中秋節(jié)典禮邀請(qǐng)函
典禮時(shí)間:
20xx.9.11(上午10:3013:00)
典禮地點(diǎn):
葡萄園(望京西路季景沁園207-106)
邀請(qǐng)參與者:園內(nèi)所有家庭
典禮流程:
10:2010:30季景中心廣場(chǎng)簽到
10:30--10:40 中秋晨圈
10:4010:50 過(guò)渡環(huán)節(jié)
11:5011:10 猜燈謎
11:1011:50 制作月餅
11:5012:00 偶戲《嫦娥奔月》
12:0012:40 團(tuán)園餐
12:4012:50 收拾環(huán)節(jié)
12:5013:00 摸秋
關(guān)于中秋慶典的邀請(qǐng)函(三)
皓魄當(dāng)空寶鏡升,云間仙籟寂無(wú)聲 ;
平分秋色一輪滿(mǎn),長(zhǎng)伴云衢千里明;狡兔空從弦外落,妖蟆休向眼前生;靈槎擬約同攜手,更待銀河徹底清 。 -《中秋》李樸(唐)
風(fēng)兒清,月兒明,潺潺江水流不停。
歌聲響,花燈亮,心心相連愛(ài)團(tuán)圓。
彩虹橋華德福學(xué)校小學(xué)部
誠(chéng)摯地邀請(qǐng)家人朋友,相聚邕江之濱
在花好月圓的日子里,共度佳節(jié)!
關(guān)于中秋慶典的邀請(qǐng)函(四)
百草園濃濃的開(kāi)學(xué)典禮過(guò)后,最最讓孩子們和家長(zhǎng)們期待的當(dāng)屬----中秋節(jié)慶典活動(dòng)。
中秋節(jié)是我國(guó)的傳統(tǒng)佳節(jié),中秋節(jié)有許多習(xí)俗,諸如:文人賞月、民間拜月、月光馬兒、兔兒爺、玩花燈、舞火龍、少數(shù)民族的祭月拜月習(xí)俗。此外,在中秋節(jié)這一天人們都要吃月餅以示團(tuán)圓。
節(jié)日,尤其是傳統(tǒng)節(jié)日是生活中神圣和特殊的日子,也是每一位孩子天天都在期盼的日子。慶祝傳統(tǒng)節(jié)日不但讓孩子在特定的日子里表達(dá)崇敬之情,享受到他們期待的歡樂(lè)和喜悅,而且也讓孩子對(duì)生活充滿(mǎn)美好的期盼和向往。金秋送爽的九月,我們迎來(lái)了豐收?qǐng)F(tuán)圓的中秋佳節(jié)。讓我們和孩子一起念著節(jié)日的童謠,聽(tīng)流傳的民間故事,一起體驗(yàn)節(jié)日的傳統(tǒng)風(fēng)俗。
三木給大家提前帶來(lái)活動(dòng)照片,不知屏幕前的你,有沒(méi)有找到兒時(shí)中秋節(jié)的記
關(guān)于中秋慶典的邀請(qǐng)函(五)
一、中秋節(jié)的來(lái)歷與演變
中秋節(jié)形成于唐朝初年。
秋季為農(nóng)歷七、八、九3個(gè)月,八月十五恰值三秋之半,是中間一個(gè)月的正中間的日子,就自然被稱(chēng)作中秋節(jié)。古人說(shuō)仲秋節(jié)。古代以伯、仲、叔、季表示排行,仲是排行第二的意思。江南一些地方稱(chēng)八月節(jié),北方人稱(chēng)八月十五。由于其習(xí)俗多和月亮有關(guān),民間又有月亮節(jié)、月夕的叫法。這時(shí)正值許多瓜果成熟上市,又稱(chēng)果子節(jié)。此外還有團(tuán)圓節(jié)、八月半、秋節(jié)等名稱(chēng)。
關(guān)于節(jié)日的形成說(shuō)法有三種:
1、源于上古時(shí)期就開(kāi)始的月亮崇拜。
2、源于祭祀月亮中的女神嫦娥(人們把月亮人格化了)。
3、源于古人在秋季為慶祝豐收而舉行的祭祀土地神的活動(dòng)。
二、活動(dòng)時(shí)間:20xx年9月29日下午16:0020:00
三、活動(dòng)地點(diǎn):
太原市晉源區(qū)鳳凰農(nóng)莊內(nèi)沃禾蒙特梭利小學(xué)
四、活動(dòng)內(nèi)容及流程:
16:0016:30 戲劇《月上玉兔》
分組活動(dòng):
16:3017:00 打月餅
17:0017:30 做燈籠
17:3018:00 游戲
18:0018:30 拓葉子畫(huà)
18:3019:00 祭月儀式
19:0019:30 游燈(每人拿著自己的燈籠,安靜的隨隊(duì)伍前行,品味那一份靜謐肅穆的美)
19:3020:00 篝火活動(dòng),分享食物
吟詩(shī)、歌唱、共舞
. 20:00 夜宿校園(孩子夜宿校園,家長(zhǎng)自行離校)
五、參加活動(dòng)需帶物品:
1、剪刀 2、膠棒 3、餐盒 4、各類(lèi)健康食品(水果、點(diǎn)心、自制便當(dāng)?shù)让朗? 5、垃圾袋 6、請(qǐng)給孩子帶較厚被褥。
溫馨提示:
1、請(qǐng)大家愛(ài)護(hù)校園內(nèi)及果園內(nèi)的各類(lèi)植物及果實(shí),請(qǐng)勿隨意摘取;