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RPHPLC法測定健肝靈膠囊丹酚酸B含量

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【摘要】建立高效液相色譜法測定健肝靈膠囊中丹酚酸B含量的方法。方法色譜柱:UltimateXB-C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流速:1.0ml/min;柱溫:25℃;流動相:乙腈-甲醇-甲酸-水(10:30:1:59);檢測波長:286nm;進樣量:10μl。結果丹酚酸B在濃度為20.22~161.76μg/ml時線性關系良好,r=0.9999,平均回收率為100.86%;RSD為1.6%(n=6)。結論該方法簡單、準確,可作為健肝靈膠囊的質量控制。

【關鍵詞】高效液相色譜法健肝靈膠囊丹酚酸B

【Abstract】ObjectiveToestablishaHPLCmethodfordeterminationofsalvianolicacidBinJianganlingcapsules.MethodsUltimateXB-C18column(5μm,4.6mm×250mm)wasusedwiththemobilephaseconsistedofacetonitrile-methanol-formicacid-water(10:30:1:59).Theflowratewas1.0ml/min.Thecolumntemperaturewas25℃andthedetectionwavelengthwas286nm.ResultsAgoodlinearrangewasshownattheconcentrationofsalvianolicacidBfrom20.22to161.76μg/ml(r=0.9999).Theaveragerecoveryratewas100.86%(RSD=1.6%,n=6).ConclusionThemethodissimpleandaccurate.ItcanbeusedforthequalitycontrolofJianganlingcapsules.

【Keywords】RP-HPLC;Jianganlingcapsule;salvianolicacidB

健肝靈膠囊由五味子種子浸出物、靈芝浸膏、丹參浸膏組成,具有益氣健脾、活血化瘀,降低谷丙轉氨酶的功能,用于急性、遷延性、慢性肝炎。丹參含有丹參酚、丹參素、丹參酮等多種活性成分,用于治療冠心病、心絞痛。近年又廣泛用于治療多種肝病,包括急慢性肝炎、脂肪肝、肝纖維化、肝腹水等。隨著藥理研究的深入,丹參治療在肝病方面顯示出越來越廣闊的前景。該制劑現只有對其五味子種子浸出物中含有的五味子甲素進行含量測定的方法,而方中的丹參浸膏含有多種水溶性活性成分,為完善標準,控制其產品質量,現采用反相高效液相色譜法對制劑中的丹酚酸B進行定量分析,建立了可靠、準確的質量控制方法。現報告如下。

1儀器與試藥

Agilent1200高效液相色譜儀;丹酚酸B對照品(中國藥品生物制品檢定所提供,批號111562-200605);健肝靈膠囊(吉林白山正茂藥業股份有限公司,批號:20060401,20060705;吉林省輝南輝發制藥股份有限公司,批號:051102。規格均為:每粒裝0.5g),乙腈、甲醇均為色譜純,其他試劑均為分析純。

2方法與結果

2.1色譜條件色譜柱:UltimateXB-C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流速:1.0ml/min;柱溫:25℃;流動相:乙腈-甲醇-甲酸-水(10:30:1:59);檢測波長:286nm;進樣量:10μl。

2.2對照品溶液制備精密稱取丹酚酸B對照品10.11mg,置50ml容量瓶中,用水溶解并定容至刻度,制成202.2μg/ml的貯備液。分別精密量取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0ml,各置10ml量瓶中,加稀乙醇稀釋至刻度,分別制成20.22、40.44、80.88、121.32、161.76μg/ml的溶液,即得。

2.3供試品溶液制備稱取本品內容物約2.5g,精密稱定,置于具塞錐形瓶中,精密加入水50ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率400W,頻率80kHz)40min,放冷,再稱定重量,用水補足減失的重量,搖勻,濾過,取續濾液通過0.45μm的微孔濾膜作為供試品溶液。

2.4線性范圍分別精密量取“2.2”項下的丹酚酸B對照品溶液各10μl注入高效液相色譜儀進行測定,測量峰面積。以對照品濃度(μg)為橫坐標,峰面積為縱坐標,經線性回歸。結果表明:丹酚酸B在20.22~161.76μg/ml范圍內與峰面積線性關系良好。其回歸方程為:Y=3.26+11.61X,r=0.9999。

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