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【摘要】目的觀察當歸補血湯能否通過降低尿酸而改善大鼠血管內皮細胞功能。方法將40只大鼠隨機分成對照組、模型組、治療組(低、中、高)劑量，模型組給予高尿酸飲食，對照組給予普通飲食，治療組給予高尿酸飲食的同時給予當歸補血湯治療(低、中、高)3個治療劑量;14d后分別測定各組大鼠血管內皮細胞所分泌的一氧化氮(NO)和一氧化氮和酶(NOS)含量，同時測定血清中尿酸含量、治療組與模型組比較，觀察各項指標有無統計學意義。結果①與對照組相比：高尿酸血癥組大鼠內皮細胞產生的NO，NOS均減少，有統計學意義(P<0.05)。②治療組與模型組相比較：給予當歸補血湯治療后血清尿酸水平降低，同時血管內皮細胞分泌的NO和NOS含量升高，其中中劑量組與模型組相比有顯著的統計學意義(P<0.05)，低劑量和高劑量組與模型組相比無統計學意義。結論當歸補血湯可以通過降低尿酸而改善血管內皮細胞功能。從而治療冠心病。

【關鍵詞】當歸補血湯;高尿酸血癥;內皮細胞功能

當歸補血湯源于金代李杲的《內外傷辨惑論·景傷胃氣論》，全方由黃芪和當歸按5∶1組成，是中國傳統的補氣養血的代表方劑，主治勞倦內傷，氣弱血虛，陽浮外越。在臨床上用于勞累性心絞痛和心肌梗塞后正虛邪惡，氣血雙虧，心失所養等癥[1]。該方應用廣泛，但關于它對尿酸水平的影響的研究很少，本實驗通過給予高尿酸血癥大鼠當歸補血湯治療，一方面觀察其對尿酸水平的影響，另一方面觀察其對血管內皮細胞功能的影響。

1材料與方法

1.1實驗動物Wistar大鼠60只，雌雄各半，體重(250±10)g，由河北醫科大學實驗動物中心提供。合格證編號805108。

1.2實驗藥品腺嘌呤(Adenine)，批號H65821購自南京建成生物制品有限公司，乙胺丁醇片(Ethambutol),批號T08B524，購自杭州民生藥業集團有限公司。當歸補血湯，當歸∶黃芪為5∶1，由河北保定古城醫藥生產。試劑盒均購自南京建成生物制品有限公司。

1.3實驗儀器雙功能水浴恒溫振蕩器(型號：SHA-BA產地：金壇市杰瑞爾電器有限公司);漩渦混勻器(型號IKA-MSZ產地：IKAWorksGuangzhou);低速臺式離心機(型號TDL-5-A,產地：上海安亭科學儀器廠);501-A型超級恒溫器(產地：上海,實驗儀器廠有限公司);Stat-Fax-2100酶標儀(產地：Awarenesstechnologying.);高速冷凍離心機(型號GL-16G-Ⅱ型產地：上海安亭科學儀器廠)。

1.4動物模型的制備高尿酸血癥動物模型的建立采用腺嘌呤+乙胺丁醇法，腺嘌呤100mg·kg-1·d-1+乙胺丁醇250mg·kg-1·d-1，溶于2ml生理鹽水中灌胃1次/d，共7d，此種方法制造的模型尿酸水平穩定升高，乙胺丁醇的應用增加了尿酸在體內的蓄積[2]。

2方法

將實驗動物隨機分成5組，對照組與模型組，治療組(低、中、高3個治療組)，各組動物均為雌雄各半。首先自由飲食1周，然后對照組給予普通飲食，模型組給予高尿酸飲食，治療組給予除高尿酸飲食外，同時給予當歸補血湯，低、中、高3個劑量分別按3.0，6.0，12g/kg/d給予大鼠灌胃，1次/d，14d后處死大鼠，腹主動脈取血，高速離心后取血清進行檢測，同時留取主動脈血管內皮細胞，孵育后檢測一氧化氮及一氧化氮合酶。

2.1檢測指標及方法分別檢測對照組、模型組與治療組中血清尿酸水平，看造模是否成功，同時看當歸補血湯對尿酸的影響。檢測血清中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平，看組織抗氧化情況及損傷的程度。取主動脈留取血管內皮細胞，檢測一氧化氮(NO)的水平和一氧化氮合酶(NOS)的活性，各項指標的測定均采用酶聯免疫吸附法，試劑盒均購自南京建成生物制品有限公司，具體操作步驟見試劑盒說明書。

2.2統計學方法數據以(±s)表示，采用F檢驗，q檢驗，t檢驗，檢驗水準a=0.05。

3結果

表1對照組、模型組與治療組血清尿酸水平的比較對照組vs模型組，▲P<0.001;模型組vs低劑量組，▲P<0.001;中劑量vs模型組，▲P<0.001;高劑量vs模型組，▲P<0.001;低劑量vs中劑量，★P<0.05;中劑量vs高劑量，★P<0.05

圖1各組血清尿酸水平柱狀圖

以上結果表明，當歸補血湯對降低血尿酸水平有明顯的療效，低、中、高劑量組均有療效。表2各組血管內皮細胞分泌的NO、TNOS、iNOS水平的比較

NO水平的統計學分析表明：模型組vs對照組，★P<0.01;模型組vs低劑量組，P>0.05;模型組vs中劑量組，★P<0.05;模型組vs高劑量，P>0.05;低劑量vs中劑量，★P<0.05;中劑量vs高劑量，P>0.05;TNOS及iNOS水平的統計學分析表明：模型組vs對照組，★P<0.05;模型組vs低劑量組，P>0.05;模型組vs中劑量，★P<0.05;模型組vs高劑量，P>0.05;低劑量vs中劑量，★P<0.01;中劑量vs高劑量，P>0.05

上述結果表明，高尿酸水平可以減低內皮功能，當歸補血湯可以減低尿酸水平，從而改善內皮功能，其最合適的劑量為中劑量，低劑量和高劑量對內皮功能也有改善作用，但無顯著性意義。

4討論

本實驗結果表明，對高尿酸血癥造成的血管內皮細胞功能的影響，本實驗體現為血管內皮細胞分泌的NO水平及NOS活性的降低，治療組分別給予當歸補血湯(低、中、高)劑量治療，14d后分別觀察血清尿酸水平及NO水平和NOS活性。通過統計學分析得出如下結論：與模型組相比，3種劑量組對血尿酸水平均有降低作用，但低劑量組和高劑量組對于尿酸水平的影響無統計學意義(P>0.05)，只有中劑量組有明顯的降低血尿酸水平的作用，有統計學意義(P<0.05)。同樣，當歸補血湯對于血管內皮細胞功能的影響，與模型組相比，觀察NO水平和NOS活性，3個劑量組均有效，經治療后其中中劑量組NO水平和NOS活性均增高，與模型組相比有統計學意義(P<0.05)，低劑量組和高劑量組也有升高NO水平和TNOS活性的作用，但與模型組相比無統計學意義(P>0.05)。通過上述實驗結果可以看出，當歸補血湯有降低血尿酸的作用，并且通過降低血清尿酸水平可以改善血管內皮功能，3個劑量中，中劑量是最合適的治療劑量。

當歸補血湯組方簡單，黃芪當歸可靈活配伍，達到益氣補血活血的目的，療效確切。臨床上關于當歸補血湯的研究很多，雷燕等[3]研究表明，當歸補血湯具有增加缺血心肌微血管密度和促進血管生成因子表達的作用，使血管密度增加，可能與其一起活血作用有關。而雷燕等[4]的臨沂研究表明，當歸補血湯有促進血管內皮細胞增殖的作用，其機制尚不明確。黃水清等[5]的研究表明，對于高脂血癥及動脈粥樣硬化家兔給予當歸補血湯治療后，當歸補血湯具有較好地降低總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇的作用，而且還可以通過調整血脂，使家兔動脈粥硬化的脂質斑塊面積縮小，故有抗動脈粥樣硬化的作用。動脈粥樣硬化和高脂飼料喂養的動物血中超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化物酶的活性降低，而相應的過氧化脂質丙二醛(MDA)卻升高[6]，給予當歸補血湯治療后，血清中MDA明顯降低，而SOD活力有明顯的提高，SOD的提高對過氧化脂質MDA的清除有較大的作用，故SOD的升高和MDA的降低是當歸補血湯的抗動脈粥樣硬化的機制之一。

本實驗研究表明了當歸補血湯可以通過降低水平而達到改善血管內皮細胞功能的作用。其機制可能與下列方面有關：尿酸可以阻滯細胞外過氧化氫對SOD的降解，SOD是維護內皮細胞和血管功能的關鍵酶，可以催化過氧化氫和超氧陽離子反應，從而阻止NO的滅活，維護NO的濃度和維護內皮細胞的功能。所以尿酸增高可以導致血清中SOD降低[7]，而降低了尿酸水平就可以改善血管內皮細胞功能，這些作用可能與其益氣活血作用有關。當歸補血湯降低尿酸及改善血管內皮細胞功能的作用療效肯定，其機理復雜，有待進一步探討。超級秘書網：

【參考文獻】

[1]張瑩雯謝丹.當歸補血湯對糖尿病大鼠腎組織的保護作用[J].中成藥，2005，27(1)：75.

[2]譚寧.高尿酸血癥動物模型的研究進展[J].醫學理論與實踐，2003，16(8)：896.

[3]雷燕，王培利，林燕.當歸補血湯對實驗性心肌梗死衰老大鼠缺血心肌的促血管生成作用[J].中國中醫基礎醫學雜志，2005，11(12)：123.

[4]雷燕，高清.當歸補血湯促血管內皮細胞增殖作用的研究[J].中國中西醫結合雜志，2003，23(10)：753.

[5]黃水清，王斌，王劍.當歸補血湯抗家兔動脈粥樣硬化形成的實驗研究[J].北京中醫藥大學學報，2005，28(5)：38.

[6]LankinVZ,VikhertAM,KosykhVA,etal.enzymicdeoxicationofsuperoxideanion-radicalsandlipoperoxidesinintimaandmediaofatheroscleroticaortio[J].BiomedBiochimActa,2002,43(5)：797.

[7]林慶斌，廖升榮.SOD的研究進展[J].化學世界，2006，5：378