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本文作者：侯士芳黃家學(xué)作者單位：協(xié)和干細(xì)胞基因工程有限公司

專利涉及保護(hù)內(nèi)容

通過對(duì)上述授權(quán)專利技術(shù)方案的分析，根據(jù)所保護(hù)基因、所涉及細(xì)胞、使用載體或技術(shù)途徑等內(nèi)容進(jìn)行篩選，對(duì)表2保護(hù)范圍較寬泛的4項(xiàng)專利［3-6］的發(fā)明內(nèi)容予以列表比較。

主要專利價(jià)值分析

1最早申請(qǐng)的細(xì)胞重編程技術(shù)專利

這里首先要提到的是由RudolfJaenisch在2004年11月24日提交的申請(qǐng)［3］，于2010年3月23日獲得授權(quán)，優(yōu)先權(quán)日期可以追溯到2003年11月26日。這項(xiàng)專利涵蓋的范圍較廣，獨(dú)立權(quán)利要求1要求保護(hù)一種含有多向分化潛能基因的體細(xì)胞系，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞。第一次明確提到該細(xì)胞系含有內(nèi)源性多向分化潛能基因Oct4或Nanog，并說明該基因具有重編程體細(xì)胞的潛力。該權(quán)項(xiàng)還提到在該細(xì)胞系中引入表達(dá)Oct4、Nanog或Sox2的外源基因也能起到重編程的作用。進(jìn)一步，該專利指明這種內(nèi)源性基因是在多能胚胎干細(xì)胞里表達(dá)的一種基因，它對(duì)于胚胎干細(xì)胞的多向分化能力至關(guān)重要。隨著胚胎干細(xì)胞的分化程度逐漸升高，這種基因的表達(dá)水平會(huì)逐漸降低。相應(yīng)的該體細(xì)胞中引入的外源基因所編碼的多向分化蛋白也是一種在多向分化潛能胚胎干細(xì)胞里表達(dá)的一種蛋白質(zhì)，隨著胚胎干細(xì)胞的分化程度逐漸升高，這種蛋白質(zhì)的表達(dá)水平會(huì)逐漸降低。Jaenisch［7，8］隨后又提出了兩項(xiàng)后續(xù)申請(qǐng)，并且要求這些后續(xù)申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)日期同樣是2003年11月。Jaenisch在他的專利以及其后續(xù)申請(qǐng)中都提到了各種重編程因子，包括染色質(zhì)重構(gòu)因子；Nanog、Oct4以及Stella等基因編碼的多向分化潛能蛋白；以及對(duì)維持細(xì)胞多向分化能力至關(guān)重要的基因。例如，Sox2、FoxD3、LIF、Stat3、BMP和PD098059等基因。雖然這些后續(xù)申請(qǐng)當(dāng)中提及的重編程技術(shù)或因子目前還沒有得到廣泛的應(yīng)用，但是Jaenisch可能會(huì)要求對(duì)這些重編程因子及技術(shù)授予專利權(quán)。

2保護(hù)范圍寬泛的“Yamanaka”的美國專利

這里要討論的第二項(xiàng)專利是日本京都大學(xué)的山中伸彌（Yamanaka）教授所獲得的美國授權(quán)專利［6］，該專利是將3種基因?qū)肫つw細(xì)胞制備ips細(xì)胞的基本方法和將兩種基因及促進(jìn)細(xì)胞分化的蛋白質(zhì)導(dǎo)入一般細(xì)胞制備iPS細(xì)胞的基本技術(shù)。該專利包含兩個(gè)獨(dú)立權(quán)利要求項(xiàng)，涉及2種基本的基因群組合，其中一組為Oct家族、Klf家族和Myc家族基因組合；另一組為Oct家族，Klf家族和細(xì)胞素的組合。在此基礎(chǔ)上，該專利給出多種組合方式涉及數(shù)10種因子。由表3可以看出，該專利不僅擴(kuò)大了基因保護(hù)范圍，同時(shí)給出了去掉潛在致癌因子c-Myc的重編程因子組合。另一方面使用多個(gè)從屬權(quán)利要求對(duì)可能存在的因子組合及替代因子做了全面保護(hù)，除非有全新的功能基因出現(xiàn)，否則很難超越該專利的保護(hù)范圍。該專利的另一特點(diǎn)就是未限定用于運(yùn)輸基因進(jìn)入的載體。該專利保護(hù)內(nèi)容寬泛，克服了其在日本、歐洲專利中存在的主要技術(shù)缺陷，極大限度的降低了iPS細(xì)胞技術(shù)發(fā)展更新所帶來的沖擊，顯現(xiàn)出較大的保護(hù)價(jià)值。