最近中文字幕2018免费版2019,久久国产劲暴∨内射新川,久久久午夜精品福利内容,日韩视频 中文字幕 视频一区

首頁 > 文章中心 > 風流一生

風流一生

前言:想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎?我們特意為您整理了5篇風流一生范文,相信會為您的寫作帶來幫助,發現更多的寫作思路和靈感。

風流一生范文第1篇

風流果可以生吃嗎

風流果可以生吃,或者是炒、燉后食用。但是,一般不直接食用,泡水喝居多。其性溫熱,善補。藏人常以此物加牛骨燉湯,喝過此湯周身溫熱,可只穿氈衣在冰天雪地中過夜)。神奇植物孕育壯陽極品重現男人往日風采。

風流果價格多少錢一斤

2021一般十幾塊錢一斤,但西藏野生的一般三四十元一斤不等,不同地方還有一定的差異,不同品牌,包裝也會不一樣的,僅供參考。

風流果的主要成分是風流果、紅景天、葫蘆籽提取物、西番蓮、桃仁、菊粉、鋅等。其中風流果又成壯陽果,含豐富的維生素、蛋白質、微量元素 、脂肪等,可以為人體補充多種營養物質,可以有效地抵抗疲勞。紅景天可以健脾益氣、清肺止咳和活血化瘀。葫蘆籽提取物可以加強肝臟和腸道的的減輕肝臟負擔。西番蓮提取物含多種蛋白質、維生素以及礦物質,可以讓人體精力充沛。桃仁提取物能促進腸道蠕動,改善消化不良。其中的鋅能促進生長發育,提高免疫力。由此可見風流果是對人體是非常好的。

風流果是可以長期吃嗎

風流一生范文第2篇

“如何才算深愛一個人?”

“是為她每天洗衣做飯,噓寒問暖,呵護有加,讓她永遠不孤獨不寂寞?還是為她買一所大房子,給她一個溫暖安定的未來?可是,這些我都做到了啊。”

“如何才能忘記一個人?”

“是每個夜晚驅逐關于她的夢,每個白天逃避填滿她的生活?還是結束沒有她就隨時會枯萎的我自己的生命?”

“對于死亡,我唯一的遺憾是,沒有為愛死去,而是為失去愛而死去?!?/p>

這些充滿傷感和絕望的文字,如一把把重槌,一下下敲打著冷潔的心。冷潔在8月炎熱的天里,開始發抖,繼而如此傷感。

這是一封以遺書形式開頭的信,總共10頁紙,已經開始泛黃,是一個男人寫給一個女人的。他說了他們的相識,20歲的年紀,青春張揚的歲月,那些仿佛發著光的美好片段。他們的相戀,抵抗著父母強勢的反對,朋友不看好的眼光,還有彼此的誤會,卻依舊閃閃發亮的愛情。他們一起走過的5年,他們的夜晚,火熱的,溫情的,獨特的。女孩如花,從最初的緊閉羞澀到逐漸開放,給與他最致命的溫暖和柔軟。最后是變心后的女孩,不愛他,卻傷害他。他喝湯的時候拿勺是錯,用筷子是錯,直接喝也是錯。他睡覺的時候靠近她是錯,挨著她是錯,遠離她也是錯。她讓他覺得,自己活著就是個錯。

變了的心,是無法挽回的。男人放了女人,給她自由,卻囚禁了自己,看不見活著的希望。所以,他寫了遺書,準備自殺。

一個陌生男人寫的遺書,竟然看哭了冷潔。

她讀一遍,哭一遍,仿佛那個男人所承受的所有悲傷她都能感受到。那么厚重而濃烈。愛情美麗又殘忍,總是傷害那個最認真的人。

2

男人真的自殺了嗎?

冷潔急切地想知道。雖然,信的落款是2010年的3月2日,距離現在已是兩年多了,但是,冷潔卻覺得這個故事仿佛就在她的眼前。一個被愛傷透,無法自愈的男人,絕望到只能結束自己的生命,用以忘記愛情的痛。

這封遺書是冷潔3天前發現的。它放在房子角落的床頭柜最下層,平?;静粫タ吹奈恢?。

冷潔住進這個房子才半個月,她來到這座城市也不到半年,如何去尋找兩年前的一個陌生男人呢?更何況還不能確定他的生死。

雖然如此,冷潔還是想尋找。假如他們最后幸福地生活在一起了,這樣的話,冷潔覺得自己也會再一次相信愛情。

城市不大,只有3家比較大型的醫院,冷潔一一去查詢,2010年3月2日,有沒有一個男人因為自殺而被送來醫院?

就這樣,一周后,冷潔可以確定,那一天,并沒有因為自殺而送去醫院的男人。

那么,他是不是并沒有死亡?

3

冷潔是兩周后找到那個男人的。

其實,并不是多么奇妙的一件事。男人還活著,是租給冷潔房子的房東。

冷潔最初是在網上看見租房信息的,那個時候,她原來的房子剛好到期,她也想換個環境,就聯系了這個租房的人。

所以,冷潔尋找了兩周,一直沒有任何線索,她突然想起了可以問房東,這個房子以前住的人是什么樣的,去了哪里。

房東沉默了很久,告訴冷潔,這個房子以前是他自己住的,兩年前開始一直空著。

冷潔才明白,原來房東就是那個自殺未遂的男人。

男人叫林浩生,高高瘦瘦,帶著金絲邊眼鏡,很儒雅的樣子,他約了冷潔,問她為何要問以前誰住在這里。

冷潔愣了很久,她還是說了,說了那封遺書。

林浩生看向遠方,一直沒有說話。冷潔覺得很難過,也自責,為何要撕開別人或許早已愈合的傷口呢?也許,無論如何深刻的感情,都最終會被時間的洪流沖淡,消失在記憶的彼岸。

最后,林浩生只是深深地嘆了一口氣,仿佛嘆出了悠長而遙遠的悲傷。

但是,他也和冷潔說了那封遺書。他想到自殺,卻想起了年邁的父母,想起了曾經給與他愛和溫暖的朋友,最后決定好好活下去。

至于窟里的女人,早已經散落天涯了。

林浩生是用看似很釋然的語氣說的,冷潔卻感覺到了他的悲傷:他眉間深深的紋路,讓冷潔無緣由地心疼,想用手撫平它,想抱抱這個男人,給他一些溫暖。

4

自從那次后,冷潔和林浩生突然就熬了起來。

她也和他說了她的故事?;蛟S天下男女的故事總是如此雷同——最初總是美好的,你儂我儂,仿佛世界上真的不存在其他的異性了。也總覺得自己一輩子都不可能變心,山盟海誓,毫不覺得虛假。慢慢,看見了彼此的缺點,爭吵,原諒,眼淚,如此循環,讓心疲憊,卻不忍放手。即使如此,冷潔也從沒有想過要分開。直至看見對方早已投入男一個懷抱,重復著昨天的故事。

他們仿佛是一對同病相憐的病人,互相鼓勵,互相安慰,給與彼此溫暖。

所以,產生愛情,也很順理成章。

新的愛情,如一劑良藥,像春雨一樣,無聲地治療著受傷者的心。

冷潔自己也不知道,原來自己也還是可以如此愛另外一個人。她愛林浩生,愛他偶爾的沉默和皺眉,愛他做出的一手好菜,愛他修長的手指,愛他手心的溫暖,愛他說出的每句話,也愛他夜晚帶給她的絢爛。

林浩生帶給冷潔的夜晚,是她從未感受過的。在那些被暮色掩蓋的深夜里,冷潔覺得自己的身體仿佛變成了一個精美的樂器,而林浩生就是那個天賦異稟的樂士,他的每個動作,都能激發出她身體最美妙的樂章。她在他的彈奏下,輕聲吟唱,或者急促呼吸。她感受到了生命最快樂的極致,也看見了最燦爛的煙花。

林浩生也喜歡拍照,他給冷潔拍過很多漂亮的照片。照片里的冷潔,美得連她自己都不敢相信。

他們也拍過很多合照,親密的,幸福的,或者搞怪的。

冷潔記起了從前在某個書里看到的一句話:當新的愛情來臨時,以前的統統不算數。

她現在也如此想了。

5

甚至,他們都開始計劃結婚了。

冷潔每天都是興奮的,她拉著林浩生告訴他房子要如何裝修。要買青花瓷一樣的花瓶,里面插上嬌艷的玫瑰和清新的百合。要把臥室的墻紙換成一大片向日葵的樣子,看著就讓人快樂。也要買糖果色的布藝沙發,暖色調的吊燈,在冬天也會覺得溫暖。

林浩生對冷潔很縱容,仿佛一個長輩對小女孩的寵溺。他都答應,說一切聽她的。

他們的愛情,差那么一點就能開往天長地久了。

在冷潔裝修屋子的第十天,她在林浩生衣柜的最下層衣服堆里發現了一個大金子。那一刻,冷潔就突然覺得全身無力,她把盒子拿出來,自己坐了很久,直到天色暗了,才有勇氣打開它。

全是照片。

一張張的照片散了出來,照片上都是林浩生和不同女孩的親密合照。每一張照片里,都是一個年輕漂亮的女孩,唯一不變的都是林浩生,他熟悉的眉眼,看似幸福的表情。每個照片后面,都有標號,從1到13。原來,她只是他的14。照片的最底下,是一個紙條,上面寫著,如果有50個女孩因為那封遺書愛上我,你會不會有哪怕一點后悔,后悔曾經殘忍地一去不回?

冷潔渾身顫抖,原來,自己所以為的幸福,都是一場錯覺。

冷潔撕碎了所有的照片,她也剪碎了自己所有的衣服,毀了剛裝修一半的房子。即使如此,冷潔還是在顫抖,她的體內仿佛有怎么也無法熄滅的怒火和委屈。

她無法毀滅自己,所以就毀了這間房子,還有自己在房子里的所有東西。

6

林浩生被眼前的場景所驚呆,直到他看見被撕碎的照片碎片。

是的,這是他的秘密。

冷潔是第十四個。

他曾經最愛的那個女孩,在他深愛她的時候,義無反顧地背叛了他,讓他痛不欲生,讓他跌入悲傷的谷底,再也看不見陽光。他甚至想過自殺,寫了那封遺書。最后,卻沒有了勇氣,把遺書隨意塞進了那個床頭柜。

他懷著破碎的心情,打算把這個房子租出去,以免自己睹物思人。

直到第一個租他房子的女孩找上門,說愛上了他,就因為看見了那封遺書。

原來,對于一段感情的祭奠,可以獲取新的感情。

那時,他還身處最痛苦的深淵,有時甚至找不到繼續活下去的理由。所以,他就在心底給自己打賭,如果有50個女孩因為那封遺書愛上自己,那么他就把所有和這些女孩的照片都寄給那個拋棄自己的女人,告訴她,失去他,是她的損失。因此,他在網上貼出租房信息,把遺書放在不同位置,他的房子只租給年輕的女孩。

女孩都是感性而有母性的。她們看見那封飽含深情的遺書,都會被打動,繼而同情林浩生,然后這份同情變成了愛情了。

逐漸地,林浩生自己都覺得有些病態而瘋狂,收集不同女孩的愛情成了他生活的一部分。最初的愛情對于他的傷害已經很小了,他似乎逐漸陷入了被不同女孩愛上的刺激里。

可是,冷潔是不一樣的。

林浩生是真的愛上她了。他已撕毀那封遺書,并且打算和冷潔結婚。

所以,林浩生重新裝修了房子,一切都是按照冷潔的想法。他想,她只是生氣了。半年的愛情肯定會抵得過她的生氣,她肯定會回來的,和他結婚,在她喜歡的房子里和他過一輩子的,他們將只有快樂和幸福,沒有任何痛苦和傷害。

風流一生范文第3篇

截止到5月15日,短短10個交易日,萊茵生物(002166.SZ)的股票價格從12.48元飚升到26.49元,漲幅高達112%,隨后該股至5月22日一直停牌,被市場譽為“流感概念第一股”。

甲型H1N1流感疫情在全球的爆發,讓A股市場上不少流感概念股大幅上漲。萊茵生物由于能夠生產抗甲型H1N1流感病毒藥物“達菲”的重要原料莽草酸,而受到資金的熱烈追捧。

桂林萊茵生物科技股份有限公司,主要從事包括羅漢果甜甙(羅漢果提取物)、ROSAVINS(紅景天提取物)等多種植物提取物的生產經營,屬于新興的植物提取行業。植物提取物廣泛應用于制藥(尤其是現代中要)、保健品、食品飲料等行業,是上述行業的主要原料之一。

但事實上,萊茵生物自2007年9月登陸A股市場以來,其盈利能力節節下滑。2008年由于受到了雪災、食品安全問題、人民幣升值和全球金融危機等客觀因素的影響,特別是全球金融危機爆發以來,公司客戶主要分布地北美和歐洲地區的產品需求降幅較大。這些客觀因素,使得公司業績下降幅度非常犬,2008年僅實現凈利潤4.06萬元,同比下降80.69%。

公司力爭在2009年度全年實現營業收入14.800萬元,凈利潤1.420萬元。但2009年,國際和國內經濟環境仍面臨諸多的不確定性因素,公司的業務發展面臨很大挑戰。今年一季度。公司營業收入同比下降37.47%,預期二季度市場需求不會發生明顯的好轉。

雖然市場主觀認為公司將大幅受益于此次甲型H1N1流感的全球流行,但是,難道甲型H1N1流感疫情會在全球無休止發展?事實是,公司并沒有獲得羅氏公司的訂單,截止到5月7日,公司僅簽訂了4筆“達菲”原料藥莽草酸買賣合同,總合同價款為727.10萬元,并且這些合同已經達到了公司的最大生產能力。值得注意的是,這些合同對公司業績影響相當有限。

另外,目前國內有能力生產“達菲”藥的原料莽草酸的企業尚有若干家,甚至有兩家為抗流感藥物“達菲”生產企業羅氏的供應商,這些因素將會導致公司后續莽草酸訂單存在極大不確定性。因此,公司能否明顯受益于此次全球甲型H1N1流感存在著極大的不確定性。

業績不明朗,加之前期漲幅過大,該股的風險正在增加。植物提取行業是一下新興的行業,日前市場主要集中在歐美等發達國家。在國內,同類各家企業都處于起步階段,規模不大,尚未形成龍頭企業。雖然公司是業內領先的企業,但由于國內同行眾多,市場集中度很低,公司所占市場份額仍然不高,維持在3%左右。雖然公司有望獲得高于行業增速的成長,但目前仍然未能在終端市場的控制和開拓上取得突破,成長的前景受到明顯的限制,對外需市場依賴較大,盈利能力得不到持續的保障。

萊菌生物的股價經過前期的大幅上漲后,目前已經處于高位,存在很太的風險。公司目前的市盈率為489.4倍,市凈率為6.96倍,市銷率為25.68倍,而生物制藥行業對應的可比數據分別為92.8倍、8.21倍、7.63倍。做了這樣簡單的估值分析,就可看到公司的股價缺乏業績支撐,明顯偏高。

風流一生范文第4篇

事實上,早在2009年底,本人就曾透過主流媒體公開建議您考慮并購Palm,但是沒有得到任何官方回應。有趣的是,此后半年不到,惠普就宣布以12億美元現金收購Palm。2011年9月,本人又建議您考慮并購黑莓,但是似乎三星、華為對此建議更為重視并且付諸了實際行動。

今天,本人再次給您寫信,談的還是那個老話題—— 如何在移動互聯網時代轉型升級。

“在PC硬件領域,只會存在Apple和IBM。我不認為會有很多第三或第四梯隊的公司。我認為大多數創新性公司會專注于軟件而不是硬件?!边@是1985年喬布斯接受《花花公子》雜志專訪時說出的一個預言。顯然,偉大的喬布斯錯了,面對PC硬件,盡管他預測到了未來的殘酷,但是他怎么也不會想到,就連鼻祖IBM也最終選擇了退出。

2005年,聯想集團斥資12.5億美元接盤IBM的PC業務。毫無疑問,當時的IBM處于一個歷史性的交叉路口,一個是高端咨詢市場,一個是低端硬件市場,必須二選一。

一眨眼,8年過去了。我們不得不承認,IBM不愧是藍色巨人,富有遠見卓識。假設IBM選擇今天再出售PC業務,還能有人愿意以12.5億美元接盤嗎?更重要的是,沒有當初的果敢斷臂,IBM還能心無旁騖地戰略轉型嗎?

如今,聯想集團也和IBM一樣站在了一個歷史性的交叉路口,一個是持續萎縮的PC市場,一個是高歌猛進的Mobile市場。往哪兒走?這恐怕連瞎子都能看出來,何況是您?

2011年1月18日,聯想集團宣布成立移動互聯和數字家庭業務集團(簡稱MIDH),劉軍出任總裁。從這個舉措不難看出,楊元慶看到了大趨勢,但是,卻遠遠沒有達到徹骨銘心的透徹程度,否則,怎會讓劉軍出馬?

如果說桌面電腦是固體,筆記本電腦是液體,那么,智能手機和平板電腦就是氣體。在這三級跳之中,最后一跳才是最高難度的驚險一躍,弄得不好就是機毀人亡。在我看來,無處不在的氣體才應該被定義為聯想集團的主營業務,而固體和液體都只是輔、過渡性業務而已。

所以,結論很簡單,MIDH的領導者只有唯一一個人選,那就是楊元慶自己。另外,MIDH的名稱必須要斬釘截鐵地刪除DH,MI就是全部。歷史證明,這個世界上從來就不存在雙拳戰略,既要防守又要反擊,最后就成了中國足球。

態度,決定高度。格局,決定結局。

您有一個著名的管理三段論:“搭班子、定戰略、帶隊伍。”按照這個理論,“搭班子”是重中之重。這一點從如今的蘋果就可見一斑,庫克接過喬布斯帥印之后,一班高手就選擇紛紛棄船而去。為什么?這就是庫克和喬布斯的差距。

“搭班子”之后就是“定戰略”。那么,聯想集團摸索兩年半的所謂移動互聯網戰略又是什么呢?

在“云管端”三個維度之中,聯想集團的布局不可謂不廣,從智能手機、平板電腦、智能電視到云盤、應用商店,甚至可穿戴式設備。但是,事實證明,雜而不精的廣種,必然導致薄收甚至不收。

即便是楊元慶最為稱道的智能手機業務,其實也存在戰略定位的大問題。

首先,在“高端精品”還是“大眾消費”之間的左右搖擺,先左再右已經直接導致聯想集團浪費了兩年半的寶貴光陰。從高端精品轉到大眾消費,竟然成了MIDH津津樂道的成功轉型。更可笑的是,日前,MIDH中國業務部總經理馮幸拋出了“緊跟電信運營商是聯想手機根本策略”的豪言壯語。

今時今日,面對移動互聯網狂潮,中國的電信運營商早已是惶惶不可終日,您把命運押在其上,難道不感到背后隱隱發涼嗎?

既然說到電信運營商,不妨提一個小小的插曲。8月2日,中國移動在北京了旗下兩款自有品牌智能手機。如果仔細研究不難發現,中國移動智能手機策略與聯想智能手機策略高度重疊,核心均是圍繞渠道的大眾消費。

盡管目前還不能肯定中國聯通及中國電信何時跟進,但是,中國移動釋放出來的信號已經非常明顯,定位為大眾消費的中國智能手機廠商即將遭遇與虎謀皮的尷尬局面。

面對日益動蕩的外部局勢,楊元慶一定要明白一件事,“打鐵還需自身硬”,聯想集團的當務之急是拿出一款能夠稱得上“包打天下”的硬通貨,這個產品可以是智能手機、平板電腦,也可以是智能電視、智能手表甚至智能眼鏡,但是,前提必須要集中力量辦大事,千萬不能再面面俱到,什么都干。

當然,綜合評估下來,聯想集團最可能取得突破的“硬通貨”還是智能手機。

但是,大眾消費的策略顯然是不會取得成功的。放眼國內,堅定不移地執行此策略的廠商多如牛毛,在這方面,同為中華酷聯俱樂部成員的華為、中興,甚至酷派恐怕比聯想都要強得多,更何況那些早已“上山下鄉”多年的華強北族群們。大眾消費就是“鴉片”,一抽就精神,但是長此以往對體質傷害極大。

那么,聯想集團該干點什么才能夠擺脫魔咒呢?

企業級移動應用才是聯想集團應該押寶的未來。事實上,長期以來,中國政企客戶群一直是聯想集團賴以起家的利基市場。而在移動互聯網時代,因為聯想集團缺乏跟得上時代的解決方案,三星、蘋果在肆無忌憚地侵蝕市場。一個真實案例是,上海中山醫院為了啟動電子病歷及智能查房系統,一次性為700名醫生配備了三星Galaxy Tab平板電腦。而這僅僅只是冰山一角而已。

7月31日,奧巴馬對美國報業的衰落發表評論:“隨著互聯網越來越占據優勢,傳統新聞業的現實也是制造業和零售業所面對的現實。我們必須要認識到,過去的美好時光一去不復返了。”

對于聯想集團而言,您恐怕也必須要認識到,過去的美好時光一去不復返了。

最后,我個人衷心地祝福聯想集團,盡管,如今它只是聯想控股旗下無數成員中的一員而已,但是,我個人以及我身邊的很多人士還是深深地覺得,對于今天的中國來說,急缺的是蘋果,而不是VC、藍莓、白酒和房地產。

風流一生范文第5篇

【關鍵詞】 玉屏風散 荷瘤小鼠 免疫功能

玉屏風散出自元·朱丹溪的《丹溪心法》, 由黃芪、 白術和防風等組成, 具有益氣固表、 扶正止汗、 祛風御風等功效。前期研究發現玉屏風散對免疫抑制模型小鼠的免疫功能具有明顯的促進作用[1]。眾所周知腫瘤的發生、 發展與宿主的免疫系統功能密切相關, 二者互為因果, 腫瘤患者往往存在免疫抑制, 抵抗力下降、 反復感染等問題, 因此提高腫瘤患者機體的免疫功能, 對于腫瘤的防治具有十分重要的意義。本研究中我們探討了玉屏風散的抗腫瘤效果以及對荷瘤小鼠免疫功能的調節作用,為進一步開發免疫增強劑的抗腫瘤藥物提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料 C57BL/6純系小鼠,雌雄各半(體質量18~22 g)購自吉林大學實驗動物中心。S180細胞株購自中科院上海細胞庫, 于牡丹江醫學院病原生物學研究室昆明鼠腹腔接種傳代。YAC1細胞株購自中科院上海細胞庫。一氧化氮檢測測試盒購自深圳晶美生物工程有限公司。RPMI1640培養基為美國Gibco 公司產品。刀豆蛋白A(ConA)、 MTT為Sigma公司產品。

1.2 方法

1.2.1 玉屏風散煎劑的制備 按《中華人民共和國藥典》的標準取黃芪、 防風和白術常規煎煮3次, 去渣、 混合、 濃縮配成1 kg/L 的玉屏風水煎液。

1.2.2 動物分組與處理 C57BL/6純系小鼠36只, 適應性飼養3 d后, 隨機分成3組, 每組12只(雌雄各半): (1)正常對照組(NC); (2)荷瘤對照組(CC); (3)玉屏風散治療組(Y)。除正常對照組外, 其余二組于左前肢腋下皮下注射2×109/L S180瘤細胞懸液0.2 mL, 接種24 h后開始灌胃給藥, 玉屏風水煎劑組每只小鼠給以25 g/(kg·d)玉屏風水煎劑灌胃, 對照組給予等體積生理鹽水灌胃, 連續灌胃給藥12 d, 于第13 天處死小鼠進行相關檢測。

1.2.3 對荷瘤小鼠體內抑瘤作用的觀察 實驗小鼠于末次給藥24 h后處死。剝離瘤體, 稱量瘤體濕重, 按下列公式計算抑瘤率。抑瘤率=[對照組平均瘤質量(mg)-實驗組平均瘤質量(mg)]/ 對照組平均瘤質量(mg)×100%。

1.2.4 NK細胞殺傷活性的規定 實驗小鼠于末次給藥24 h后脫頸處死, 無菌取脾, 常規制作脾細胞懸液, 調整細胞密度5×109/L; 另將連續傳代培養之靶細胞YAC1細胞, 密度調為2.5×108/L, 各取100 μL加入96孔板(效靶比20∶1), 3復孔, 另設效應細胞對照孔、 靶細胞對照孔, 37℃、 50 mL/L CO2孵箱培養20 h離心棄上清100 μL, 加入MTT應用液(5 g/L) 10 μL, 再繼續培養4 h, 加入溶解液DMSO 100 μL, 充分吹打至甲臜顆粒完全溶解后, 酶標儀測定A595值, 按公式計算NK活性。NK細胞活性=[靶細胞對照孔A595值-(實驗孔A595值-效應細胞對照孔A595值)]/靶細胞對照孔A595值×100%。

1.2.5 小鼠腹腔巨噬細胞NO產生能力及吞噬功能測定 實驗小鼠于末次給藥24 h后處死, 常規制備腹腔細胞懸液, 調整細胞密度為2×109/L, 將該細胞加入24孔培養板內, 每孔1 mL。37℃、 50 mL/L CO2貼壁3.5 h, 傾去上清液, 洗滌細胞3次, 除去非黏附細胞, 加入EDTA重新懸浮細胞, 用含有10 mL/L FCS的RPMI1640培養液調細胞密度至1×109/L。37℃、 50 mL/L CO2培養24 h后, 收集各組培養上清液, 使用比色法試劑盒測定NO, 按說明書操作[2]。另將2×109/L腹腔巨噬細胞加入96孔細胞培養板內, 每份樣品設3復孔, 每孔100 μL。在恒溫37℃、 50 mL/L CO2培養箱中培養4 h后, 每孔加入100 μL、 4 g/L中性紅生理鹽水溶液, 繼續培養4 h。取出培養板, 用0.01 mol/L, pH7.4的PBS清洗3次, 每孔加入0.2 mL巨噬細胞裂解液。經4℃ 3 h后, 用酶標儀測定A540值[3]。

1.2.6 T細胞增殖能力的測定 采用MTT比色法[4], 常規制作實驗小鼠脾細胞懸液, 調整細胞密度至5×109/L, 加入96孔細胞培養板中, 100 μL/孔, 再加入ConA 100 μL/孔, 使其終濃度為6 mg/L, 置于37℃、 50 mL/L CO2培養箱68 h。取出, 從每孔中吸出 80 μL上清后。加入5 g/L MTT 10 μL/孔, 置培養箱內4 h。取出, 加100 g/L SDSHCl溶液100 μL/孔, 振蕩過夜, 用酶標儀測定A570值。以各樣本A570值代表T細胞增殖能力。

1.2.7 脾細胞產生IL2能力測定 采用絲裂原激活淋巴母細胞法[4], 無菌摘取脾臟, 常規制作脾細胞懸液, 調整細胞密度至5×109/L, 加入24孔細胞培養板中, 1 mL/孔, 再加入ConA使其終濃度為6 mg/L, 置于37℃、 50 mL/L CO2培養箱48 h。吸出上清, 以3000 r/min離心10 min。取出上清即為粗制的IL2, 分裝置于-20℃保存待測。取C57BL/6純系小鼠, 常規制作脾細胞懸液, 調整細胞密度至5×109/L, 加入終濃度為2 mg/L ConA, 培養48 h使之淋巴母細胞化。取出, 洗滌細胞后, 加入96孔細胞培養板中, 100 μL/孔。同時, 加入待測的IL2100 μL/孔, 置于37℃、 50 mL/L CO2培養18 h, 以MTT比色法測定A570值。以各樣本A570值代表其產生IL2的能力。

1.2.8 統計學處理 以上結果所有數據以x±s表示, 采用統計學處理軟件SPSS9.0進行統計學分析, 組間比較采用t檢驗。

2 結果

2.1 玉屏風散對荷瘤小鼠S180肉瘤的抑瘤作用 研究可見正常對照組小鼠生長良好、 活潑、 皮毛光滑; 實驗組小鼠接種瘤細胞后飲食減少、 皮毛無光澤, 均可觸及皮下腫塊, 解剖小鼠剝離瘤體可見, 玉屏風散治療組腫瘤生長緩慢, 與荷瘤對照組比較有統計學意義(P

表1 玉屏風散對荷瘤小鼠S180肉瘤重量的影響(略)

Tab 1 Influence of yupingfengsan on the S180 tumor weight of tumorbearing mice

bP

2.2 玉屏風散對荷瘤小鼠NK細胞活性的影響 研究顯示荷瘤小鼠NK細胞的殺傷活性明顯下降, 與正常對照組比較有統計學意義(P

表2 玉屏風散對荷瘤小鼠NK細胞活性的影響(略)

Tab 2 Influence of yupingfengsan on the activity of NK cells in the tumorbearing mice

bP

2.3 玉屏風散對荷瘤小鼠腹腔巨噬細胞功能的影響 研究顯示荷瘤小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能較正常組比較明顯下降(P

表3 玉屏風散對荷瘤小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能及NO分泌的影響(略)

Tab 3 Influence of yupingfengsan on the phagocytosis activity and secreted NO of peritoneal macrophage in tumorbearing mice

bP

2.4 玉屏風散對荷瘤小鼠T淋巴細胞增殖及脾細胞IL2產生的影響 細胞免疫在抗腫瘤免疫中發揮重要作用, 研究顯示S180荷瘤小鼠的T細胞增殖能力及脾細胞IL2的產生較正常對照比較明顯下降(P

表4 玉屏風散對荷瘤小鼠T淋巴細胞增殖及脾細胞IL2產生的影響(略)

Tab 4 Influence of yupingfengsan on the T lymphocytes proliferation and secreted IL2 of splenic cells in tumorbearing mice

bP

3 討論

機體的免疫狀態與腫瘤的發生、 發展密切相關, 當宿主免疫功能低下或受抑制時, 腫瘤的發病率增高, 而在腫瘤進行性生長時, 腫瘤患者的免疫功能又會受到抑制, 可見免疫功能低下是阻礙宿主戰勝疾病及恢復健康的重要因素, 因而提高宿主的免疫功能及其活力是當前腫瘤防治的有效途徑之一。玉屏風散是一傳統古方, 具有扶正固本之功效, 大量的實驗研究表明其對免疫功能低下的動物模型具有明顯的增強免疫功能作用[1], 推測其可能對腫瘤感染者的免疫功能產生調節作用, 因此在實驗中我們觀察了玉屏風散對S180肉瘤在小鼠體內生長的影響, 及其對荷瘤鼠特異性、 非特異性免疫功能的影響。

實驗制備了S180荷瘤鼠動物模型, 研究發現給予玉屏風散后, 明顯的抑制了荷瘤小鼠S180肉瘤的生長。提示玉屏風散在小鼠體內一定程度的發揮了抗腫瘤功效。同時也驗證了小鼠荷瘤后機體免疫功能受到明顯抑制, 表現為腹腔巨噬細胞吞噬功能下降, NO分泌量減少, T淋巴細胞的增殖功能及IL2產生能力受到抑制, NK細胞活性降低, 表明荷瘤小鼠的免疫系統處于抑制狀態, 然而T淋巴細胞, NK細胞、 巨噬細胞等這些免疫細胞在腫瘤免疫方面均起著重要作用。文獻[5]報道體內的巨噬細胞被激活后, 具有殺傷腫瘤細胞的功能, 其效應和方式是通過直接對腫瘤細胞的殺傷和產生溶解腫瘤細胞的效應分子而實現的, NO則是重要的效應分子之一。T細胞介導的免疫應答, 在抗腫瘤免疫中發揮重要作用, CTL對腫瘤細胞進行特異性識別殺傷, 同時Th細胞的功能也尤為重要, Th細胞分為Th1、 Th2細胞,Th1細胞以分泌IL2等細胞因子, 通過活化CTL、 NK和巨噬細胞增強細胞免疫功能[6], 近年研究顯示, 大多數的腫瘤患者和荷瘤動物體內Th1細胞細胞功能下降, 主要體現在其產生的細胞因子減少[7, 8], 我們的研究與文獻報道相符。NK細胞在抗腫瘤免疫中, 即可受Th1產生的細胞因子調控, 參與特異性細胞免疫的效應階段, 同時又作為非特異免疫細胞, 可殺死不表達MHCⅠ 類分子的逃逸CTL殺傷的腫瘤細胞。應用玉屏風散治療后的荷瘤小鼠的巨噬細胞吞噬功能及NO分泌量、 NK細胞活性、 T淋巴細胞增殖能力及IL2的產生均明顯增高, 提示玉屏風散對荷瘤小鼠的特異性和非特異性免疫功能均有明顯的增強作用。

由此可見玉屏風散可有效的增強荷瘤小鼠的免疫功能, 從而發揮其抑制腫瘤的作用。

參考文獻

[1] 張, 張曉莉, 宋寶輝, 等. 玉屏風散對免疫抑制小鼠的免疫功能的調節作用[J]. 細胞與分子免疫學雜志, 2001, 17(4): 398.

[2] 陳偉珠, 侯 敢, 張海濤, 等. 豬荃多糖對小鼠腹腔巨噬細胞一氧化生成 、 iNO S活性和細胞內還原型谷膚甘肚含量的影響[J]. 廣東醫學院學報, 2003, 21(4): 319-323.

[3] 劉志輝, 葛秀君, 孟慶勇, 等. 海藻多糖對γ射線照射小鼠腹腔巨噬細胞免疫功能的影響[J]. 現代中西醫結合雜志, 2006, 15(7): 861- 863 .

[4] 王 濟, 顧立剛, 彭桂英, 等. 束縛應激對S180荷瘤小鼠Th1/Th2型細胞因子及腫瘤生長的影響[J]. 細胞與分子免疫學雜志, 2003, 19(6): 525-527.

[5] Liu CY, Wang CH, Lin TC. Increased level of exhaled nitric oxide and upregulation of inducible oxide synthase in patients with primary lung cancer[J]. Br J Cancer, 1998, 78(4): 534-541.

[6] Ouan WD Jr, Vinogradov M, Quan FM, et al. Continuous infusion interleukin2 and famotidine in metastatic kidney cancer[J]. Cancer Biother Radiopharm, 2006, 21(5): 515-519.

主站蜘蛛池模板: 孝感市| 安庆市| 嘉峪关市| 宁乡县| 蛟河市| 甘谷县| 洛宁县| 湾仔区| 东山县| 五大连池市| 安阳县| 高密市| 安丘市| 建昌县| 汾阳市| 密云县| 鄯善县| 台东县| 鹤庆县| 基隆市| 温宿县| 宜昌市| 南汇区| 邯郸县| 嘉义市| 资兴市| 新乡市| 乳源| 本溪| 中山市| 长兴县| 屏东县| 彭泽县| 河北区| 兖州市| 启东市| 龙胜| 利津县| 宁城县| 牟定县| 日照市|