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【摘要】 目的: 監(jiān)測(cè)急性髓性白血病(AML)患者接受異基因造血干細(xì)胞移植(alloHSCT)后外周血中的T細(xì)胞受體重排刪除環(huán)(TRECs)水平, 了解移植后早期的T細(xì)胞免疫重建情況。方法: AML患者15例分別在alloHSCT前以及alloHSCT后每隔2周收集外周血, 采用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMNCs)中的TRECs水平; 7例年齡相近的正常人外周血樣本作為對(duì)照。流式檢測(cè)CD45RA+細(xì)胞亞群和CD45RO+細(xì)胞亞群的陽(yáng)性率。結(jié)果: alloHSCT組移植前的TRECs平均拷貝數(shù)為(1.42±1.51)拷貝/1000 PBMNCs, 明顯低于正常組的(3.03±0.45)拷貝/1000 PBMNCs水平; 移植后第12周的TRECs平均拷貝數(shù)為(1.67±1.93)拷貝/1000 PBMNCs, 與正常相比仍然較低。移植后8周內(nèi)以CD45RO+/CD4+細(xì)胞的擴(kuò)增為主, 而外周血TRECs水平在alloHSCT后4周左右出現(xiàn)短暫地升高趨勢(shì), 隨后又下降, 至alloHSCT 8周后才開(kāi)始穩(wěn)步上升。有急性移植物抗宿主病(aGVHD)病史的移植患者的外周血TRECs水平顯著降低, 明顯低于無(wú)aGVHD病史移植患者的外周血TRECs水平。3例移植后早期復(fù)發(fā)的患者的外周血TRECs水平降至基線水平或檢測(cè)不到。結(jié)論: 不同個(gè)體T細(xì)胞免疫重建時(shí)間存在差異; AML患者在alloHSCT后早期(90 d內(nèi))的胸腺輸出功能仍處于恢復(fù)階段, 移植后4周內(nèi)的免疫重建仍以來(lái)源于供者細(xì)胞的外周擴(kuò)增為主; 外周血TRECs水平可能與AML患者alloHSCT后病情的發(fā)展、 轉(zhuǎn)歸有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】 造血干細(xì)胞移植, 異基因; T細(xì)胞受體重排刪除環(huán); 免疫重建
異基因造血干細(xì)胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, alloHSCT)是目前治療急性髓性白血病(acute myelogenous leukemia, AML)等惡性血液病的有效方法之一, 已廣泛應(yīng)用于臨床。造血干細(xì)胞移植后造血功能的全面重建主要包括兩個(gè)方面, 即造血細(xì)胞數(shù)量和功能的恢復(fù), 后者主要是指免疫功能重建。臨床上往往將中性粒細(xì)胞和血小板的恢復(fù)作為造血恢復(fù)的指標(biāo), 容易忽視免疫功能的恢復(fù)。免疫功能重建現(xiàn)在被認(rèn)為是評(píng)價(jià)移植療效的重要因素之一, alloHSCT后重建T細(xì)胞特異性免疫功能, 需要來(lái)源于胸腺依賴途徑所產(chǎn)生的初始T細(xì)胞, 即經(jīng)胸腺發(fā)育而輸出的nave細(xì)胞, 而目前能夠作為nave T細(xì)胞的標(biāo)志的是T細(xì)胞受體刪除DNA環(huán)(Tcell receptor excision DNA circles, TRECs)[1-3]。為了解AML患者接受alloHSCT后早期的T細(xì)胞免疫重建情況, 我們對(duì)其胸腺近期輸出功能(外周血TRECs水平)進(jìn)行了監(jiān)測(cè), 并對(duì)外周血CD45RA+/CD4+、 CD45RO+/CD4+及CD45RA+/CD8+細(xì)胞亞群進(jìn)行了流式細(xì)胞術(shù)分析。
1 對(duì)象和方法
1.1 對(duì)象 接受alloHSCT治療的AML患者15(男13, 女2)例, 年齡18~56(中位年齡35.7)歲, 其中M2 5例, M3 2例, M4 5例, M5 3例; 供者為HLA位點(diǎn)完全相合同胞或無(wú)關(guān)供者; 采用聯(lián)合氟達(dá)拉賓的減量清髓預(yù)處理方案; 移植后受者全部植活(中性粒細(xì)胞連續(xù)3 d≥0.5×109/L為粒細(xì)胞植活, 血小板連續(xù)7 d≥20×109/L為血小板植活), 所有受者移植后均為完全供受者嵌合體; 所有患者alloHSCT后臨床上未采用改變細(xì)胞亞群數(shù)量的特殊治療方案, 并均告知同意及醫(yī)院倫理委員會(huì)同意。分別于移植前、 移植后每間隔2周收集患者外周血樣本; 同時(shí)收集7例與移植組年齡相近的正常人(均為男性)外周血樣本作為對(duì)照, 年齡17~48(中位年齡31.6)歲。
1.2 方法
1.2.1 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD45分子表達(dá)和DNA提取 按常規(guī)方法收集各樣本的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMNCs), 計(jì)數(shù)后一部分細(xì)胞用于免疫熒光標(biāo)記(鼠抗人CD4+、 CD8+、 CD45RA、 CD45RO mAb, Fermentas), 利用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行CD45RA+/CD4+、 CD45RO+/CD4+及CD45RA+/CD8+細(xì)胞亞群陽(yáng)性率的檢測(cè); 剩余細(xì)胞提取DNA(QIAprep Spin Miniprep Kit, QIAgen), 并用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA的濃度及純度。
1.2.2 引物設(shè)計(jì) 從T細(xì)胞受體(TCR)δ基因組序列(ACCESSION AE000661)中于δRec基因片段的下游設(shè)計(jì)一下游引物(T1)和在ψJα的上游設(shè)計(jì)一上游引物(T2)[2], 引物的方向恰好與一般的PCR引物相反(所檢測(cè)的是δRec和ψJα的兩個(gè)基因片段刪除后重組形成的環(huán)形DNA, 即TRECs), 并在該擴(kuò)增片段中間設(shè)一熒光素標(biāo)記探針(T3); 選擇RAG2基因作為細(xì)胞定量對(duì)照: 分別在RAG2基因組序列(ACCESSION M94633)中設(shè)計(jì)一對(duì)引物(R1和R2)及一熒光素標(biāo)記探針(R3)。引物和探針由德國(guó)柏林TIB生物公司合成。
1.2.3 RAG2TREC標(biāo)準(zhǔn)品的構(gòu)建 利用兩對(duì)引物分別擴(kuò)增所需的RAG2和TRECs的基因片段, 經(jīng)序列分析證實(shí)后分別將其連接到TA載體上(TOPO TA Cloning Kit, Invitrogen), 轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)菌擴(kuò)增, 抽提、 純化質(zhì)粒后再經(jīng)酶切、 PCR和測(cè)序證實(shí)目的基因片段的準(zhǔn)確性; 用凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)質(zhì)粒的濃度及純度, 根據(jù)質(zhì)粒分子量換算為拷貝數(shù), 稀釋標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒, 將其調(diào)整為梯度濃度: 107、 106、 105、 104、 103、 102和10拷貝/2 μL。
1.2.4 實(shí)時(shí)定量PCR 每一標(biāo)本分別檢測(cè)2次RAG2和2次TRECs, 總反應(yīng)體積為25 μL, 其中含標(biāo)準(zhǔn)品2 μL或約100 ng基因組DNA, 0.5 μmoL/L引物, 0.2 mmoL/L dNTP, 1.5 U Ampli TaqGold(ABI, USA), 0.1 μmoL/L的6 FAM TAMRA探針和PCR緩沖液(含4 mmoL/L MgCl2)。在95℃ 10 min變性后, 共進(jìn)行45個(gè)循環(huán)擴(kuò)增, 每一循環(huán)包括95℃ 30 s和64℃ 1 min。反應(yīng)在MJ Opticon Monitor(BIORAD)中進(jìn)行。反應(yīng)分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)組(7個(gè)濃度)、 陽(yáng)性對(duì)照組(兩個(gè)平行反應(yīng))、 陰性對(duì)照(兩個(gè)平行反應(yīng))及樣品組。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 根據(jù)所檢測(cè)樣本中RAG2的實(shí)測(cè)數(shù)值來(lái)確定所檢測(cè)樣本中所含的細(xì)胞數(shù)(每個(gè)細(xì)胞含2個(gè)RAG2拷貝), 然后計(jì)算每1000個(gè)PBMNCs中所含的TRECs拷貝數(shù), 計(jì)算公式為: n=2×1000×[TRECs(1)+TRECs(2)]/[RAG2(1)+RAG2(2)]; 使用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理, 采用非參數(shù)檢驗(yàn)的MannWhitney U檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較; 各組樣本中的平均TRECs水平以x±s表示。
2 結(jié)果
2.1 alloHSCT后CD45RA+細(xì)胞亞群及CD45RO+細(xì)胞亞群陽(yáng)性率的變化 alloHSCT后各時(shí)間組的CD45RA+細(xì)胞亞群和CD45RO+細(xì)胞亞群的平均陽(yáng)性率顯示出一定的變化趨勢(shì)(圖1)。CD45RO+/CD4+、 CD45RA+/CD8+細(xì)胞亞群的陽(yáng)性率在移植后第4周時(shí)均明顯較低, 隨后逐步上升, 8~12周又出現(xiàn)下降趨勢(shì); CD45RA+/CD4+細(xì)胞亞群的陽(yáng)性率在移植后12周內(nèi)均維持在較低水平; 移植后8周內(nèi)以CD45RO+/CD4+細(xì)胞的擴(kuò)增為主。
圖1 alloHSCT后90 d內(nèi)CD45RA+細(xì)胞亞群及CD45RO+細(xì)胞亞群陽(yáng)性率變化2.2 實(shí)時(shí)定量PCR的敏感性、 重復(fù)性和特異性 最大敏感性可達(dá)到10個(gè)拷貝/μL, 且1×107~1×102拷貝/μL的重復(fù)性良好; 模板在10個(gè)拷貝數(shù)以下時(shí)結(jié)果不穩(wěn)定, 故將檢出限為10拷貝數(shù)以上; 經(jīng)電泳可見(jiàn)到符合目的片段大小的條帶(RAG2為245 bp, TRECs為390 bp)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率(slope)均為-0.28, 系列稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品濃度與循環(huán)閾值具有較好的相關(guān)關(guān)系(r=0.996, 0.998)。無(wú)模板對(duì)照未見(jiàn)任何擴(kuò)增。
2.3 alloHSCT后外周血TRECs水平的變化 PBMNCs中的TRECs水平有著較大的個(gè)體差異。正常對(duì)照組外周血中的TRECs平均拷貝數(shù)為(3.03±0.45拷貝/1000 PBMNCs); alloHSCT組移植前的TRECs平均拷貝數(shù)為(1.42±1.51拷貝/1000 PBMNCs), 明顯低于正常組(MannWhitney U檢驗(yàn), P
alloHSCT后有急性移植物抗宿主病(acute graft vs host disease, aGVHD)病史的移植患者(3例發(fā)生腸道aGVHD, 2例發(fā)生皮膚aGVHD)外周血TRECs水平顯著降低(0.07±0.14拷貝/1000 PBMNCs), 明顯低于同時(shí)期無(wú)急性GVHD病史的移植患者外周血TRECs水平(0.82±1.12拷貝/1000 PBMNCs), 甚至趨于基線水平(MannWhitney U檢驗(yàn), P
圖2 alloHSCT后90 d內(nèi)的外周血TRECs水平變化
3 討論
TRECs是T細(xì)胞受體α基因重排形成過(guò)程中需刪除TCRδ基因而產(chǎn)生的環(huán)形DNA, 它的含量代表了TCR基因初始重排形成有功能TCR基因時(shí)的nave T細(xì)胞的含量。通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)TRECs水平以確定nave T細(xì)胞含量, 能夠確切地了解胸腺新近輸出nave T細(xì)胞的功能, 幫助進(jìn)一步了解移植后T細(xì)胞免疫重建情況。國(guó)外自2000年始將TRECs的定量檢測(cè)用于白血病骨髓移植后免疫功能重建的分析, 我們也曾將其用于檢測(cè)正常人外周血T細(xì)胞、 慢性粒細(xì)胞白血病患者和苯中毒患者胸腺近期輸出功能[2-4], 但將TRECs水平檢測(cè)用于AML患者移植后早期T細(xì)胞免疫功能重建分析, 國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。
既往的研究已發(fā)現(xiàn)胸腺近期輸出功能隨著年齡的增加而逐漸下降, 且受者的年齡是移植后T細(xì)胞免疫重建的重要影響因素[1, 5]。本研究中alloHSCT組的年齡與正常組的年齡相近, 可以排除年齡分組差異對(duì)TRECs含量檢測(cè)的影響, 可以進(jìn)行alloHSCT組與正常組的TRECs水平的比較。外周血中TRECs水平有著較大的個(gè)體差異, alloHSCT組移植前的TRECs平均拷貝數(shù)為(1.42±1.51)拷貝/1000 PBMNCs, 明顯低于正常組(3.03±0.45拷貝/1000 PBMNCs)(P
CD45RO+/CD4+、 CD45RA+/CD8+細(xì)胞亞群的陽(yáng)性率在移植后第4周時(shí)明顯降低, 隨后逐步上升, 8~12周又出現(xiàn)下降趨勢(shì), 并且移植后8周內(nèi)以CD45RO+/CD4+細(xì)胞的擴(kuò)增為主; 而外周血TRECs水平在alloHSCT后4周左右出現(xiàn)短暫的升高趨勢(shì), 后又復(fù)降, 至alloHSCT后第8周左右才開(kāi)始穩(wěn)步上升。這些結(jié)果提示移植后早期免疫重建仍以來(lái)源于供者細(xì)胞的外周擴(kuò)增為主, 移植后8周之后方顯示出經(jīng)胸腺發(fā)育而輸出的nave細(xì)胞的情況。
既往的研究報(bào)道成年患者的TRECs水平在移植后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸恢復(fù), 一般在移植2年后可恢復(fù)到正常水平, 但也可能由于原發(fā)病和預(yù)處理方案等因素影響而存在較大的個(gè)體差異[6]。本研究中的大部分AML患者在alloHSCT后12周左右的TRECs水平可稍高于移植前水平, 但總體與正常相比仍然較低, 提示AML患者移植后雖然達(dá)到了臨床緩解, 但其TRECs水平較正常水平低, 說(shuō)明其胸腺輸出功能仍處于恢復(fù)階段, T細(xì)胞免疫功能尚未達(dá)到完全重建。我們還發(fā)現(xiàn)alloHSCT后無(wú)論是正在進(jìn)行的急性GVHD還是曾發(fā)生過(guò)急性GVHD, 都能導(dǎo)致外周血TRECs水平低下, 提示急性GVHD可能導(dǎo)致胸腺功能的損傷, 抑制了胸腺依賴途徑的T細(xì)胞免疫重建。發(fā)生GVHD患者的TRECs水平降低, 一方面可能是GVHD對(duì)胸腺上皮細(xì)胞的損傷而導(dǎo)致胸腺功能的低下, 另一方面也有可能是相關(guān)免疫激活使T細(xì)胞分化、 增殖加快而稀釋TRECs的結(jié)果。另外, 國(guó)外有學(xué)者提出TRECs水平可能作為造血干細(xì)胞移植后療效及預(yù)后的評(píng)價(jià)指標(biāo)[7], 我們亦發(fā)現(xiàn)3例alloHSCT后早期復(fù)發(fā)的AML患者復(fù)發(fā)后未檢出TRECs水平(復(fù)發(fā)前為1.03、 4.03、 3.12拷貝/1000 PBMNCs), 提示外周血TRECs水平可能與AML患者alloHSCT后病情的發(fā)展、 轉(zhuǎn)歸有關(guān)。
我們初步提供了AML患者alloHSCT后早期的胸腺近期輸出功能恢復(fù)情況, 有助于正確評(píng)價(jià)T細(xì)胞免疫重建, 為評(píng)估臨床療效及預(yù)后提供初步的基礎(chǔ)研究資料, 有待進(jìn)一步積累病例數(shù), 結(jié)合各種可能影響T細(xì)胞免疫功能的相關(guān)因素分析, 獲得更詳盡的研究結(jié)果。本課題組已建立了分別分析TCR Vβ各亞家族nave T細(xì)胞輸出情況的方法[8], 我們將進(jìn)一步對(duì)移植后TCR各亞家族的TRECs水平分別進(jìn)行定量檢測(cè), 以期做出更系統(tǒng)更全面的免疫重建的評(píng)價(jià)。
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我愛(ài)大自然,其次就是藝術(shù);
我雙手烤著生命之火取暖;
火萎了,我也準(zhǔn)備走了。
這是英國(guó)詩(shī)人沃爾特?蘭德晚年寫下的詩(shī)句,題目是《生與死》。楊絳喜歡這個(gè)關(guān)于火焰的譬喻,把它譯成中文,置于晚年散文集《楊絳散文》的卷首題詞。
105歲,不可謂不長(zhǎng)壽。但火萎了,她利利落落起身,便也走了。
作為一個(gè)文化世紀(jì)老人,楊絳的身體狀態(tài)一直牽著很多人的心。這段時(shí)間,先是“病危”的傳言讓許多顆心被提到嗓子眼,又是各方辟謠讓它們放回肚子里。正當(dāng)人們以為不過(guò)是一場(chǎng)尋常小恙時(shí),猝不及防地,卻等來(lái)了最終被官方證實(shí)的消息:作家、翻譯家、中國(guó)社會(huì)科學(xué)院榮譽(yù)學(xué)部委員、外國(guó)文學(xué)研究所研究員楊季康(筆名:楊絳)先生,以105歲高齡于2016年5月25日1時(shí)10分在京逝世。
楊絳有遺愿,希望去世不作為新聞,火化后再發(fā)訃告。但在這樣一個(gè)新媒體、自媒體迭出的時(shí)代里,可以想來(lái),這個(gè)遺愿實(shí)現(xiàn)起來(lái)太難。一時(shí)間,緬懷和悼詞呼嘯而來(lái),無(wú)處不是“最賢的妻,最才的女”,乃至假托她“百歲感言”的“世界是自己的,與他人毫無(wú)關(guān)系”。這種山呼海嘯,大概不是楊絳自己愿意看到的吧――2012年,社科院院長(zhǎng)陳奎元看望她時(shí),她曾提出了三個(gè)要求:一、去世后,不開(kāi)追悼會(huì);二、不受奠儀;三、至多七八至親送送。
作為一個(gè)有影響的文化人,她低調(diào)得有些不可思議,像個(gè)古代的隱士。這些年來(lái),她閉門謝客,拒絕采訪,甚至不參加自己文集的會(huì)。九十大壽,一百大壽,這些對(duì)旁人來(lái)說(shuō)格外重要的節(jié)點(diǎn),她也都謝絕了上門祝壽。她愛(ài)用“隱身衣”的比喻,許多年里,她都披著一件“隱身衣”,“保其天真,成其自然,潛心一志完成自己能做的事”。
因了這“潛心一志”,四十年代,她有成名劇本《弄真成假》《稱心如意》,被稱為“喜劇雙璧”,被和李健吾垂青;上世紀(jì)八九十年代,她有長(zhǎng)篇小說(shuō)《洗澡》、散文《干校六記》等,成了一個(gè)重要的現(xiàn)代知識(shí)分子創(chuàng)作現(xiàn)象;新世o以來(lái),93歲時(shí)寫了她和錢鐘書(shū)、女兒阿瑗的《我們仨》,96歲時(shí)出了《走在人生邊上――自問(wèn)自答》,103歲時(shí)出了《洗澡》的續(xù)集《洗澡之后》。還有翻譯,包括最為重要的《堂吉訶德》;還有為丈夫編的作品,包括由商務(wù)印書(shū)館推出的72卷本的錢鐘書(shū)手稿集。很難想象,若不是披著“隱身衣”,這瑣碎雜亂的工作,如何能夠延續(xù)許多年,并安安心心地完成。
“我無(wú)法確知自己還能往前走多遠(yuǎn),壽命是不由自主的,但我很清楚我快‘回家’了。我得洗凈這一百年沾染的污穢回家。我沒(méi)有‘登泰山而小天下’之感,只在自己的小天地里過(guò)平靜的生活。”這是她在2011年100歲誕辰時(shí),于《文匯報(bào)?筆會(huì)》上所做的一次筆談專訪。她早已做好火焰枯萎的準(zhǔn)備。“邊上”,是她對(duì)于年歲的自我意識(shí),是她以一種并不清晰唯一的模樣游走于文學(xué)史上的姿態(tài),也是她為人生劃定的位置。
(選自《北京晚報(bào)》2016年5月27日,有刪節(jié))
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楊絳先生走了,人間再無(wú)“我們仨”。
昨天是張退票的支票,明天是張信用卡,只有今天才是現(xiàn)金;要善加利用。
每日自勵(lì)
凡是內(nèi)心能夠想到、相信的,都是可以達(dá)到的。
每日短文 編織富足人生
一輩子多長(zhǎng)?一百年夠長(zhǎng)了。它代表什么?100乘以52周,等于5200周。再乘以一周7天,等于36400天。或者接近90萬(wàn)小時(shí)。
一百歲的人瑞,原來(lái)活得并不夠長(zhǎng),它使我看清楚生命的短暫與時(shí)間的珍貴,如果不善用,倏忽即逝。時(shí)間,真的不多,就拿一天來(lái)說(shuō)吧,只二十四小時(shí),扣除睡覺(jué)與工作,加上一點(diǎn)點(diǎn)電視,一點(diǎn)點(diǎn)晃蕩,便一無(wú)所有了,只是如果連時(shí)間都沒(méi)了,還有什么,在我看來(lái),把時(shí)間全部用來(lái)工作的人最蠢,因?yàn)樗麑](méi)有時(shí)間可用來(lái)享受。人生本來(lái)就有兩種目的,一是得到你想要的,但第二則是享受你所得到的,這才是重點(diǎn)。
大文豪蕭伯納的生活感言提供我很大的思考:"生活對(duì)我而言,不是一根蠟燭,而是一枝光芒萬(wàn)丈的火炬。"是的,人生不該演成蠟燭,蠟炬成灰淚始干。
富足人生的最佳詮釋,也許是忙世人之所閑,閑世人之所忙吧。薄伽丘說(shuō)過(guò):"沒(méi)有來(lái)世,幸福就在人間。"這個(gè)想法,一直是我的座右銘,人真的沒(méi)有來(lái)世,只有一輩子,必須更用心經(jīng)營(yíng),工作只是一種媒介,藉由錢而通往美好生活;如果工作并未使人精致、優(yōu)雅、美化,努力便是一種錯(cuò),它反而會(huì)使人通往墳?zāi)埂?/p>
每個(gè)人都必須想想,有錢干嘛?我只想用它使生活更有品味,并且切記,柴米油鹽醬醋茶,不可不要;琴棋書(shū)畫(huà)詩(shī)酒花,非要不可,橫批,活得像人。
活得像人是門大學(xué)問(wèn),有些人忙得像狗,有些累得像豬,有些做牛做馬,個(gè)個(gè)都如活著的僵尸,會(huì)動(dòng)的死人,年輕的糟老頭,這種活法,不要也罷。
富足在當(dāng)下,如同日休禪師所言:"人生只有三天,活在昨天的人迷惑,活在明天的等待,只有活在今天最踏實(shí)。"今天便是這一刻,每個(gè)分分秒秒,與自己擦身而過(guò)的生活,如果全做得好,人生就好多了;我開(kāi)始懂得牽著孩子的手走在雨中,為了替他們留一點(diǎn)親子間難得的回憶,就如同我父親留給我的回憶一樣,我思考著,有一天孩子大了,他的小腦袋瓜里存有什么回憶。
兒子與我是鐵馬族,我們騎著它穿梭在大街小巷,發(fā)現(xiàn)他口中的秘密花園,在一條山澗里找著山蟹,一灣清流中賞著原生孔雀魚(yú),還有幾座天然池塘,夜來(lái)臨之前的傍晚,除了余暉之外,還有幾許美好。
夜深了,我喜歡關(guān)上電視,靜靜地坐在屋頂花園中任由微風(fēng)輕拂,星光閃爍,夜成為我白天忙碌的饋賞。沐浴開(kāi)始成為美事,記得有位心理學(xué)家便這么說(shuō),沐浴是一個(gè)人一天里最美好的獨(dú)處。我好喜歡這種想法,也奉行不渝,在忙了一天之后,放一小杯蓋的熏衣草精油,闔上眼,好好享受半小時(shí)夢(mèng)一般地溫存,我的精油常更換,有時(shí)迷上溫泉,有時(shí)戀戀迷迭香,有時(shí)泡著老姜精油,或是浸泡在中藥草里。
白天像白天,黑夜是黑夜,我因而找著富足。不同階段的人,理應(yīng)有不同的使命感,三十歲是工作的人,四十歲該升格為懂生活、會(huì)生活的人,五十歲則是優(yōu)閑人生的開(kāi)始,六十歲,我向往的是精致而優(yōu)雅的生活,七十歲時(shí),該從心所欲而不逾矩,不該再有物質(zhì)大夢(mèng),想著中樂(lè)透,不如想想如何過(guò)生活。
人生處處有富足,打造家屋也是好辦法;我自比成問(wèn)題老小孩,很喜歡自我提問(wèn),比方說(shuō),問(wèn)一問(wèn),如果廚房不是廚房,那會(huì)是什么?我的答案之一是藝術(shù)館,我便花心思于這個(gè)假設(shè)的追尋,新廚房多了兩個(gè)藝品柜,擺放旅行得來(lái)的戰(zhàn)利品,配上投影燈,簡(jiǎn)直美呆了,再把音箱對(duì)準(zhǔn)做飯之地,掛三幅畫(huà),兩盆長(zhǎng)青藤盆栽,廚房便不再只有油煙味,反而多了氣質(zhì)與品味。4政治政客笑話 4民族民間笑話 4無(wú)厘頭笑話 4文化愚呆笑話
我常佇足海邊,撿了許多漂流木,有些造形詭異,有時(shí)樸拙,有些可以當(dāng)筆架,有些可以做掛鐘,每一樣?xùn)|西都有其特色,我東拼西湊,竟也成為藝品,放在家中各角落,韻味十足。這些事全都不必花太多錢,但得花心,花了心,便有了回憶,心靈便富足了。
花心不難,但也很難,至少必須放下貪求,少了野心,減少欲望,才能多出時(shí)間,度假、旅行、閑晃、賞鳥(niǎo)、溯溪、觀星、品茗、清談、浮潛……讓生活更像人的生活。生活家格恩斯坦就說(shuō):"心動(dòng)而不行動(dòng)的人,美好永遠(yuǎn)不會(huì)降臨。"我因心動(dòng)而有所行動(dòng)。蘇軾的詩(shī),再次躍于心上--鐘鼓江南岸,歸鳥(niǎo)夢(mèng)自驚;浮云世故改,孤月此心明。
我離職就閑的這些年,除了錢少得一點(diǎn)之外,美的事可經(jīng)歷多了,至少過(guò)一段神清氣爽,閑散郊區(qū)野寺,沽酒談心;半醒半醉,觀那露臺(tái)花開(kāi),山頭紫氣,風(fēng)帆搖曳度一生的妙哉。因而看見(jiàn)夏的曼麗,秋的瑟瑟,冬的雪白,花園里綠的綠了,黃的黃了,紅的紅了。
臨流而彈,竹澗焚香,登峰遠(yuǎn)眺,坐看云起,松亭試泉,曲水流觴,煙波釣叟,蓬窗高臥,妙不可言。人生如此,你說(shuō)夫復(fù)何求?
每日文摘 留個(gè)缺口給別人
一位著名企業(yè)家在作報(bào)告,一位聽(tīng)眾問(wèn):“你在事業(yè)上取得了巨大的成功,請(qǐng)問(wèn),對(duì)你來(lái)說(shuō),最重要的是什么?”
企業(yè)家沒(méi)有直接回答,他拿起粉筆在黑板上畫(huà)了一個(gè)圈,只是并沒(méi)有畫(huà)圓滿,留下一個(gè)缺口。他反問(wèn)道:“這是什么?”“零”。“圈”/“未完成的事業(yè)”/“成功”,臺(tái)下的聽(tīng)眾七嘴八舌地答道。
他對(duì)這些回答未置可否:“其實(shí),這只是一個(gè)未畫(huà)完整的句號(hào)。你們問(wèn)我為什么會(huì)取得輝煌的業(yè)績(jī),道理很簡(jiǎn)單:我不會(huì)把事情做得很圓滿,就像畫(huà)個(gè)句號(hào),一定要留個(gè)缺口,讓我的下屬去填滿它。”
留個(gè)缺口給他人,并不說(shuō)明自己的能力不強(qiáng)。實(shí)際上,這是一種管理的智慧,是一種更高層次上帶有全局性的圓滿。給猴子一棵樹(shù),讓它不停地攀登;給老虎一座山,讓它自由縱橫。也許,這就是企業(yè)管理用人的最高境界。
每日一詩(shī) 關(guān)于金錢
有了錢,你可以買樓,但不可以買到一個(gè)家。
有了錢,你可以買鐘,但不可以買到時(shí)間。
有了錢,你可以買到一張床,但不可以買到充足的睡眠。
有了錢,你可以買一本書(shū),但不可以買到知識(shí)。
有了錢,你可以買到醫(yī)療服務(wù),但不可以買到健康。
有了錢,你可以買到地位,但不可以買到尊重。