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刺猬的擁抱范文第1篇

【關鍵詞】礦用；隔爆型真空可逆電磁啟動器；保養；維修

【分類號】：TM615

一、礦用隔爆型真空可逆電磁啟動器的維修原理

1、根據電路及工作原理查找故障范圍

弄清楚被檢修電路、設備的結構和工作原理，是循序漸進、避免盲目檢修的前提。查找故障時，先從主電路入手，看換向器合、分是否正常，然后檢查主電路的觸頭系統、熱元件、熔斷器及線路本身是否有故障，接著根據主電路與控制電路的控制關系，檢查控制回路的線路接頭、自鎖或連鎖觸點、電磁線圈是否正常，PLC的輸入、輸出電壓是否正常，從而找出故障部位。如能通過直觀檢查發現故障點，如 PLC 的指示、線圈脫落、觸頭（點）、線圈燒毀等，則檢修速度更快。

2、從控制電路動作程序檢查故障范圍

通過直觀觀察無法找到故障點，斷電檢查仍未找到故障時，可對電氣設備進行通電檢查。通電檢查前要先切斷主電路，將控制器和轉換開關置于零位，然后用萬用表檢查電源電壓是否正常，有沒有缺相或嚴重不平衡。進行通電檢查的順序為先檢查主電路，后查控制電路；先檢查交流系統、后檢查直流系統；通電檢查控制電路的動作順序，觀察各元件的動作情況，或斷開隔離開關，取下所有熔斷器，然后按順序逐一插入要檢查部位的熔斷器，合上開關，觀察各電氣元件是否按要求動作。

3、利用儀表檢查

在煤礦電氣修理中，對于隔離開關的分合是否到位，觸頭（點）的接觸電阻等是否正常，對于工作電壓、控制回路部分電壓等可用萬用表檢查；對線路、主回路的元件的有關絕緣電阻，可用兆歐表檢查。利用儀表檢查電路或電器的故障具有速度快、判斷準確、故障參數可量化等優點，因此，在電氣設備維修中應充分發揮儀表檢查故障的作用。正確的使用電工儀表是準確確定故障點的一種行之有效的檢查方法。常用的測試工具和儀表有校驗燈、測電筆、萬用表、鉗形電流表、兆歐表等，主要通過對電路進行帶電或斷電時的有關參數如電壓、電阻、電流等的測量，來判斷電器元件的好壞、設備的絕緣情況以及線路的通斷情況。在用測量法檢查故障點時，一定要保證各種測量工具和儀表完好，使用方法正確，還要注意防止感應電、回路電及其他并聯支路的影響，以免產生誤判斷。常用的測量方法有：

（1）電壓分階段測量法。設備回路（包括控制回路）在通電的情況下，用萬用表電壓檔（注意交直流選擇）以測量電壓的方式，根據電壓數值來分析判斷電路的故障情況。可以是從兩端測量（端電壓），也可以是回路當中的某個點對地電壓測量，具體要根據原理圖分析判斷。

（2）電阻分階段測量法。

（3）短接法。

4、機械故障的檢查

在礦用隔爆電磁啟動器控制線路中，有些動作是由電信號發出指令，由機械機構執行驅動的。如 KBZ-630/500、400 低壓饋電開關。如果機械部分的連鎖機構、傳動裝置及其他動作部分發生故障，即使電路完全正常，設備也不能正常運行。在檢修中，應注意機構故障的特征和表現，探索故障發生的規律，找出故障點，并排除故障。在煤礦井下生產過程中由于環境因素，開關控制線路中，可能發生故障的線路和電器較多。有的明顯，有的隱蔽；有的簡單，易于排除；有的復雜，難于檢查。在檢修故障時，應靈活使用上述修理方法，及時排除故障，確保生產的正常進行。檢修中注意書面記錄，積累有關資料，不斷總結經驗，提高修理能力。

三、礦用隔爆型真空可逆電磁啟動器的維修方法

1、經驗法

（1）彈壓活動部件法：主要用于活動部件，如接觸器的銜鐵、繼電器、按鈕等。通過反復彈壓活動部件，使活動部件靈活，同時也使一些接觸不良的觸頭產生摩擦，達到接觸導通的目的。

（2）元件替換法：對于值得懷疑的元件，可采用替換的方法進行驗證。如果故障依舊，說明故障點懷疑不準，可能該元件沒有問題。但如果故障排除，則與該元件相關的電路部分存在故障，應加以確認。在實際維修中，根據具體情況，選擇合適的方法。

2、檢測法

檢測法是指采用儀器儀表作為輔助工具對煤礦電氣線路故障進行判斷的檢修方法。由于儀器儀表種類很多，且有日新月異之勢，故檢測法發展很快，準確率大大提高，手段也日益增多。例如我們使用的 ds-11 的多功能測試儀，可以由儀器對接觸器的三相同步、線路板、綜合保護器等進行檢測，據有關部門提供的數據，故障查找率在 90%以上。但比較常用、比較實用的方法仍為利用萬用表、兆歐表和電流表對電路進行測試。電路在通電測試時，根據變壓器的輸出不同，各點之間的電壓也不同。由此測出不同元件的工作情況，找出故障點。

三、礦用隔爆型真空可逆電磁啟動器的修復與保養

當找出真空電磁啟動器設備的故障點后，就要著手進行修復、試運轉、記錄等，然后交付使用，但必須注意以下事項：

1、在找出故障點和修復故障時，應注意不能把找出的故障點作為尋找故障的終點，還必須進一步分析查明產生故障的根本原因。

2、找出故障點后，一定要針對不同故障情況和部位采取正確的修復方法。

3、在故障點的修理工作中，一般情況下應盡量做到復原。

4、電氣故障修復完畢，需要通電試運行時，應和操作者配合，避免出現新的故障。

5、每次排除故障后，應及時總結經驗，并做好維修記錄。記錄的內容包括：工業機械的型號、名稱、編號、故障發生的日期、故障現象、部位、損壞的電器、故障原因、修復措施及修復后的運行情況等。記錄的目的：作為檔案以備日后維修時參考。并通過對歷次故障的分析，采取相應的有效措施，防止類似事故的再次發生或對電氣設備本身的設計提出改進意見等。

四、結束語

總而言之，要想做好礦用隔爆型真空可逆電磁啟動器的修復與保養工作，就應該熟悉了解啟動器本身的結構原理，當出現故障時，通過望、問、摸、聞、聽、切來了解故障前后的操作情況和故障發生后出現的異常現象，根據故障現象判斷出故障發生的部位，借助檢測儀表，不斷積累經驗，我們即可準確地判斷井下防爆開關的故障，并給予快速排除故障，確保生產活動的正常進行。

參考文獻：

[1]常衛星. 可逆真空磁力啟動器故障原因及檢修的探討[J]. 河北煤炭，2012，02：39-40+44.

刺猬的擁抱范文第2篇

樹突狀細胞（dendritic cell，DC）是已知功能最強的抗原呈遞細胞，是機體T淋巴細胞特異免疫應答的直接啟動和調控者，在機體的抗腫瘤免疫應答中發揮著重要作用。在體外培養DC并用腫瘤抗原致敏后，攜帶腫瘤抗原信息的DC，在體內外激活針對該腫瘤細胞的特異性殺傷細胞。本試驗在體外用人胃癌細胞SGC提取腫瘤抗原致敏DC后誘導CIK，通過其對SGC的殺傷作用的研究為DC治療胃癌的研究提供理論及試驗依據。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

SGC由福建省腫瘤醫院分子生物學研究室提供；rhIL?鄄2、rhIL?鄄4、CD3 mAb購自Peprotech公司；rhGM?鄄CSF、Ficoll淋巴細胞分離液購自軍事醫學科學院；胎牛血清(超級)購自杭州四季青生物制品公司；人AB血清由福建省血液中心提供；1640培養基購自Gibco公司；FITC標記的小鼠抗人CD83、HLA?鄄DR、CD14、CD86及同亞型對照抗體購于晶美生物工程有限公司。

1.2 方 法

1.2.1 SGC的培養

SGC在5％CO2、37℃條件下，用含有10％胎牛血清RPMI1640培養液常規培養。

1.2.2 腫瘤細胞總蛋白的獲取

將培養貼壁腫瘤細胞用胰酶消化懸浮，離心棄上清，用無血清RPMI1640培養液重懸，超聲破膜，30 000r/min超速離心90min，取上清。濃縮透析，調整蛋白濃度為25mg/ml，經0.22μm濾膜濾過除菌，－80℃保存。

1.2.3 DC的培養[1]

無菌條件下采集的正常人抗凝外周全血，經淋巴細胞分離液梯度離心，獲取單個核細胞，用含10%AB血清的RPMI1640懸浮細胞，調整細胞濃度至5×107/ml，加1ml至6孔板內培養箱中培養2h，吸掉上清，用培養液洗去非黏附細胞，獲得貼壁細胞，每孔再加入3ml 含有rhIL?鄄4 （500U/ml）及rhGM?鄄CSF（500μg/ml）的10%AB血清的RPMI1640培養液，2~3d半量換液1次。

1.2.4 抗原負載DC及表型鑒定

將上述培養5d的DC 用含有rhIL?鄄4 （500U/ml）及rhGM?鄄CSF（500μg/ml）的10%AB血清的RPMI1640培養液調整細胞濃度為1×106/ml，向6孔板內加入2ml的細胞，每孔加入腫瘤細胞總蛋白1ml（25mg），于第8d收集懸浮細胞為抗原致敏的DC。對照組加入無血清RPMI1640培養液1ml，于第8d收集懸浮細胞為空白的DC。分別收集第1d、第5d及第8d抗原致敏的DC，用流式細胞儀檢測DC表面分子HLA?鄄DR、CD83、CD86、CD14表達。

1.2.5 CIK的培養[2]

同前法從外周血中獲取單個核細胞，用含10%AB血清的RPMI1640懸浮細胞，37℃、5%CO2培養箱中培養2h，取懸浮細胞，調整細胞數為1×106/ml，用含有IL?鄄2(250U/ml)、CD3 mAb (50μg/L)的10%AB血清的RPMI1640培養液培養，2~3d半量換液1次至第8d。試驗組用將其分別與空白的DC及抗原致敏的DC 按10：1比例相混，用含有IL?鄄2(250U/ml)、CD3 mAb( 50μg/L)的10%AB血清的RPMI1640培養液在6孔板內培養。對照組僅用含有IL?鄄2(250U/ml)、CD3 mAb (50μg/L)的10%AB血清的RPMI1640培養液在6孔板內培養。5d后分別獲取抗原致敏DC誘導CIK，空白的DC誘導CIK及CIK為效應細胞。

1.2.6 混合淋巴細胞反應（MLR）

試驗組收集成熟經抗原致敏及空白的DC，用含有IL?鄄2(250U/ml)、CD3 mAb (50μg/L)10%AB血清的RPMI1640調整細胞數為1×106/ml。收集同時期培養的CTK用同樣的培養液調整細胞數為1×107/ml。將100μlCIK分別與100μl經抗原致敏及空白的DC在96孔培養板中混合培養。對照組100μlCIK加入100μl含有IL?鄄2(250U/ml)、CD3 mAb 50μg/L10%AB血清的RPMI1640繼續培養。72h后加入四甲基偶氮唑藍（MTT）10μg，繼續培養4h，離心棄去孔內上清，每孔加入150μl二甲基亞砜（DMSO）震蕩10min，待結晶物充分溶解，用酶標儀在570nm處測OD值（A），每組設3個復孔，取均值按下式計算：

刺激指數SI=A實驗孔/A對照孔×100％

1.2.7 細胞殺傷試驗

用MTT比色法測定抗原致敏DC誘導CIK，空白的DC誘導CIK及CIK對SGC細胞的殺傷活性，效靶比為5：1、10：1、20：1。調整細胞至所需濃度，各取100μl的效靶細胞懸液加入96孔板中，于37℃、5%CO2培養箱中培養24h后，加入四甲基偶氮唑藍（MTT）10μg，繼續培養4h，離心棄上清，每孔加入150μl二甲基亞砜（DMSO）震蕩10min，待結晶物充分溶解，用酶標儀在570nm處測OD值， 同時設空白對照、靶細胞對照、效應細胞對照。每孔設3個復孔，取其均值按下式計算：

CIK細胞毒性（％）＝[1－（A效+靶－A效）/A靶]×100%

1.3 統計學方法

采用SPSS10.0軟件對數據進行析因分析及t檢驗。

2 結 果

2.1 DC形態學的觀察

從外周血獲得單個核細胞，培養2h，獲得貼壁細胞，多為體積小、圓形的單個核細胞。5d時可見細胞伸展體積變大，形狀不規則，部分細胞懸浮。經抗原致敏后第8d時可見大部分細胞懸浮，變大并伸出偽足，細胞內可見大量的顆粒，倒置相差顯微鏡下可見毛刺狀突起，為典型DC形態。

2.2 抗原負載前后DC表型的變化

用流式細胞儀檢測DC表面分子HLA?鄄DR的表達第1d為5.01％、第5d為28.21％、第8d為62.01％。CD83分別為1.03％、4.50％、15.57％。CD86分別為4.47％、25.75％、41.03％。CD14分別為13.02％、3.26％、0.55％。

2.3 混合淋巴細胞反應

顯微鏡下觀察，兩種細胞共培養過程中，可見DC細胞逐漸減少，72h后視野中已不存在DC。兩試驗組及對照組CIK細胞數均較72h前明顯增多。混合細胞培養亦顯示：抗原致敏的DC與空白的DC都具有很強的刺激CIK細胞增殖的能力，分別是細胞因子刺激能力的3.12倍和3.09倍，但兩者之間差異無顯著性意義（P>0.05）。

2.4 細胞殺傷試驗

用MTT比色法測定抗原致敏DC誘導CIK（抗原?鄄DC?鄄CIK），空白的DC誘導CIK（空白?鄄DC?鄄CIK）及CIK對SGC細胞的殺傷活性（表1）。

析因分析結果顯示：①不同因素誘導CIK對胃癌細胞SGC殺傷作用不同，抗原致敏DC誘導CIK對該腫瘤細胞殺傷作用最強（P＜0.01），提示抗原致敏DC誘導CIK對該腫瘤細胞有特異性的殺傷作用。②不同效靶比之間殺傷作用不同（P＜0.01），結果比較顯示效靶比越高，殺傷作用越強。③CIK與效靶比之間有交互作用，其中抗原致敏DC誘導CIK在效靶比為20：1時殺傷作用較其余各組強。但空白的DC誘導CIK與CIK 兩組之間分析結果顯示兩組殺傷作用差異有無顯著性意義（P>0.05），提示空白的DC誘導CIK對SGC無特異性殺傷作用。結合混合淋巴細胞反應結果提示，抗原致敏DC誘導CIK可通過激活對該腫瘤有特異性殺傷作用的淋巴細胞及促進淋巴細胞增殖兩方面可顯著性提高CIK對腫瘤的細胞殺傷作用。

3 討 論

DC在體外的致敏與其在體內發育過程相似，經歷未成熟與成熟兩個階段。未成熟DC來源于外周血或骨髓中的單個核細胞，經IL?鄄4及GM?鄄CSF誘導形成[3]。本研究亦用此方法獲得DC。體外誘導DC成熟有抗原負載、細胞因子和佐劑刺激等方法。本研究從人胃癌細胞系SGC經超聲破膜獲取含有多種腫瘤抗原的腫瘤總蛋白，用其致敏DC，顯微鏡下可觀察到致敏的DC細胞呈典型成熟DC的形態。用流式細胞儀檢測DC表面分子結果顯示 ，采用SGC抗原負載的DC，代表DC成熟的表面分子HLA?鄄DR、CD83、CD86升高，代表單個核細胞表面分子CD14下降，說明經SGC腫瘤細胞抗原負載可誘導DC成熟。

腫瘤細胞總蛋白中包含有豐富的膜抗原、MHCⅠ類和Ⅱ類抗原表位、多種熱休克蛋白分子等成分，經過DC的攝取、加工和呈遞后，可激發針對多種腫瘤抗原簇的克隆[4]；可誘導針對該抗原的特異性細胞毒性T淋巴細胞，發揮有效的抗腫瘤免疫效應[5]。CIK細胞除了具有NK細胞非MHC限制的殺瘤作用，還具有T細胞的抗瘤作用。因此用抗原致敏的DC誘導CIK細胞，與未經抗原致敏的DC誘導CIK細胞及CIK細胞相比，對相同抗原靶細胞具有更強的殺傷作用。本研究中MTT試驗的結果證實經抗原致敏的DC誘導CIK細胞的殺瘤作用較未經抗原致敏的DC誘導CIK細胞及CIK細胞殺瘤作用強。虞積仁等[6]也證實，抗原致敏的DC誘導CIK細胞僅對帶有相同抗原的靶細胞有特異性殺傷。而空白DC誘導CIK細胞與細胞因子誘導CIK缺乏特異性，兩者之間殺傷試驗無明顯差異。張宏文等[7]研究亦發現同樣結果。

混合淋巴細胞反應結果顯示DC與CIK混合培養72h后，視野中DC細胞消失與成熟DC在完成抗原呈遞后凋亡有關[8]。空白的DC與抗原致敏的DC，兩者均能明顯促進CIK增殖，但兩者之間差異無顯著性意義，張嵩等[9]亦有類似的報道。說明成熟DC促進CIK增殖與有無抗原負載無關，可能與成熟DC高表達各種黏附分子與CIK表面的受體結合促進CIK細胞的增殖有關。

本研究通過對人腫瘤細胞系SGC提取腫瘤抗原致敏DC誘導CIK殺傷功能的試驗研究，證實抗原致敏DC誘導CIK可通過誘導特異性CIK細胞及促進CIK細胞增殖兩方面顯著提高CIK細胞的殺瘤效應，為進一步的臨床試驗研究提供試驗依據。

【參考文獻】

[1] 鄭秋紅， 鄭天榮， 盧林， 等. 人外周血樹突細胞的分離與提純[J].福建醫科大學學報， 2000，34(2):115－118.

[2] 鄭秋紅， 鄭天榮， 謝云青， 等. 樹突狀細胞對自體CIK細胞體外殺傷肺腺癌細胞影響的研究[J].腫瘤防治雜志， 2005，12(16):384-387.

[3] Morse ME， Zhou LJ， Tedder TF， et al. Generation of dendritc cells in vitro from peripheral blood mononuclear cells with granulocyte?鄄macrophage?鄄colony?鄄stimulation factor， interlekin?鄄4， and tumor necrosis factor?鄄alpha for use in cancer immunotherapy[J]. Ann Surg，1997，266(1):6-16.

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[5] Vuillier F， Maloum K， Thomas EK， et al.Idiotype?鄄pulsed dendritic cells are able to induce antigen?鄄specific CTL?鄄mediated protective tumor immunity[J]. Br J Haematol， 2003，120(2):243-250.

[6] 虞積仁， 石永進， 岑溪南， 等. 細胞因子誘導殺傷細胞與抗原特異性細胞因子誘導殺傷細胞殺傷腫瘤效應比較的實驗研究[J].北京大學學報(醫學版)，2003，35(2):141-142.

[7] 張宏文， 彭曉， 張曉燕. 臍帶血DCs對CIK細胞殺傷活性的影響研究[J]. 臨床血液學雜志， 2002，15(1):25-28.

[8] McAfee JG， MacVittie TJ. The impact of recent advances in immunology and cancer therapy on nuclear medicine[J]. Semin Nucl Med，2001，31(4):342-349.

刺猬的擁抱范文第3篇

【摘要】 目的 探討姜黃素對細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK 細胞)殺傷胃癌細胞株SGC-7901作用的影響及其機制。方法 10名健康者外周血單個核細胞(PBMC)在體外經多種細胞因子誘導為CIK細胞;收集培養第5天的CIK細胞，給予不同濃度的姜黃素誘導， 37℃、5%CO2條件下繼續培養72 h，LDH法檢測CIK細胞對SGC-7901細胞的殺傷活性;FACS法檢測CIK細胞表型CD3+CD8+、CD3+CD56+含量及穿孔素、顆粒酶B水平。結果 ①姜黃素誘導后，CIK細胞殺傷胃癌SGC-7901的活性明顯提高，在10 μmol/L時殺傷活性顯著高于對照組(P

【關鍵詞】 姜黃素;CIK細胞;SGC7901胃癌細胞;殺傷活性;穿孔素;顆粒酶B

Abstract： Objective To investigate the effect and the underlying mechanism of the curcumin-induced cytotoxicity of CIK cells to gastric cancer cell line SGC-7901 in vitro. Methods The peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from 10 healthy volunteers were induced in vitro with different cytokines and transferred into CIK cells .On the fifth day， the CIK cells were collected and were induced with the addition of curcumin at different concentrations， followed by 72 hours of culture under the condition of 37℃ and 5% CO2. The antitumor cytotoxicity of CIK cells to cell line SGC-7901 was determined by LDH assay. The content of phenotypes CD3+CD8+ and CD3+CD56+ of CIK cells， the levels of perforin and granzyme B were analyzed by a fluorescence activated cell sorter (FACS). Results ①The anti-tumor cytotoxicity of CIK cells exposed to curcumin on SGC-7901 was markedly elevated and the cytotoxicity reached 62.32%±1.28% at a concentration of 10 μmol/L curcumin， with significant differences in contrast with the control group (37.45%±1.12%， P

Key words： curcumin; CIK cells; gastric cancer cell line SGC-7901; perforin; granzyme B

細胞因子誘導的殺傷(cytokine induced killer， CIK)細胞是將人外周血單個核細胞在體外經多種細胞因子共同誘導培養而獲得的一群異質性細胞，與其他過繼性免疫細胞相比，由于其具有增殖能力強、殺瘤活性高、殺瘤譜廣、副作用小、對正常骨髓造血影響輕微等優點[1-2]而被廣泛應用于腫瘤的過繼性細胞免疫治療[3]。姜黃素(curcumin) 是一種從中藥姜黃根莖中提取出來的天然化合物，有研究表明，高濃度的姜黃素對樹突狀細胞(dendritic cell， DC)、γδ T有抑制作用[4-5]，但有關姜黃素在CIK細胞作用中的影響鮮見報道，為此，我們試用不同濃度的姜黃素在體外誘導人CIK細胞，觀察姜黃素對CIK細胞殺傷活性及其穿孔素、顆粒酶B的影響，以探討姜黃素對CIK細胞殺傷胃癌細胞株SGC-7901作用的影響及其機制。

1 材料和方法

1.1 材料 姜黃素(購自Sigma公司);人胃腺癌細胞株SGC-7901(購自上海細胞生物研究所);胰蛋白酶、RPMI 1640(購自Gibco公司);人AB血清(購自徐州市血站);胎牛血清和淋巴細胞分離液(購自中國科學院血液病研究所);IL-2(購自廈門特寶生物公司);FITC標記的鼠抗人CD56(購自BD公司);PE標記的 Perforin(穿孔素)、Gran B(顆粒酶 B)和PE標記的鼠抗人CD3、APC標記的鼠抗人CD8(均購自杭州聯科生物);乳酸脫氫酶試劑盒(購自日本世諾臨床診斷制品株式會社);FACS Caliber流式細胞儀(購自BD公司)，流式細胞儀分析軟件為CellQuest，每個標本分析細胞數≥1×104/L。

1.2 方法

1.2.1 姜黃素誘導CIK細胞 抽取10名健康者外周血各10 ml，淋巴細胞分離液分離，收集單個核細胞，無菌生理鹽水洗滌3次，將細胞按4×106/L懸浮于RPMI-1640培養基中，加入經抗CD3單抗包被的6孔細胞培養板，每孔6 ml，加入終含量為5×104U/ L rhIL-2和1×106/L rhIFN-γ，置37℃、5% CO2條件下培養，每2天半量換培養基1次，并調整細胞密度至4×106/L ，5天后收集CIK細胞并配成4×106/L的細胞懸液，分別加入不同濃度的姜黃素〔0(對照組)、 1.25、2.5、5、10、20 〕μmol/L，同時設無水乙醇組(無水乙醇含量為0.1%)。每組設5個復管，置37℃、5% CO2條件下繼續培養72 h收集細胞用于實驗。

1.2.2 姜黃素誘導的CIK細胞對SGC-7901殺傷活性的檢測 按本室建立的方法[6]進行。將SGC-7901細胞株用RPMI-1640培養基培養至對數增殖期;收集細胞用Hank′s液洗2次，配成4×105/L;效應細胞(CIK)配成4×106/L，將效靶細胞數按10∶1比例混合，以1 500 r/min離心5 min，置37℃、5% CO2孵箱中孵育6 h后，輕輕混勻，再以1 500 r/min離心10 min。收集上清液，用全自動生化分析儀LD-P法測定LDH的活性(U/L)。

CIK細胞的殺傷活性(%)=(測定管LDH的U-自然釋放管LDH的U)/(最大釋放管LDH的U-自然釋放管LDH的U)×100%

1.2.3 姜黃素對CIK細胞表型的影響 收集經姜黃素誘導72 h后的CIK細胞， PBS液洗滌2次，調整細胞濃度為4×106/L，加入離心管，每管100 μl，分別加入熒光標記的單克隆抗體CD3、CD8、CD56，每一抗體每孔5 μl， 各組均設5個復孔對照，4℃暗處孵育標記20 min，PBS液洗滌，然后用流式細胞儀檢測細胞表型。

1.2.4 姜黃素對CIK細胞穿孔素和顆粒酶B水平的影響 收集經姜黃素誘導72 h后的CIK細胞，用PBS液洗滌2次，調整細胞濃度為4×106/L，加入離心管(100 μl/管)，分別加入熒光標記的穿孔素和顆粒酶B，每管加抗體5 μl，各組均設5個復孔對照。4℃暗處孵育20 min，PBS液洗滌，流式細胞儀檢測細胞表型。

1.3 統計學處理 用SPSS 13.0 統計軟件包進行數據分析，采用One-Way ANOVA進行比較，P

2 結 果

2.1 姜黃素誘導的CIK細胞對SGC-7901殺傷活性的變化 濃度為2.5～10 μmol/L姜黃素誘導的CIK細胞對SGC-7901細胞殺傷活性明顯高于對照組(P

圖1 姜黃素誘導的CIK細胞對胃癌SGC-7901的殺傷活性

與對照組比較：*P

2.3 姜黃素對CIK細胞穿孔素和顆粒酶B水平的影響 1.25～10 μmol/L姜黃素誘導的CIK細胞穿孔素和顆粒酶B水平均較對照組高，濃度在10 μmol/L時穿孔素和顆粒酶B水平顯著高于對照組，兩者比較有統計學意義(P

3 討 論

現有研究證明，姜黃素具有抗炎、抗氧化、清除自由基及抗癌等藥理作用[7-8]。Cipriani等[4]研究表明30 μmol/L以上濃度的姜黃素明顯抑制異戊烯焦磷酸鹽誘導的γδ T細胞的趨化因子釋放、擴增和依賴其活性的細胞聚集，此過程和姜黃素抑制NF-κB和AP-1活性有關;并且高濃度的姜黃素能夠呈時間和劑量依賴性地抑制γδT細胞殺傷活性，此過程通過細胞死亡途徑，導致核凋亡和大規模DNA斷裂。亦有Shirley等[5]研究表明濃度為20 μmol/L及30 μmol/L的姜黃素抑制樹突狀細胞對免疫刺激物的反應，通過阻止成熟標志物、細胞因子和趨化因子表達而促進未成熟CD4+T細胞增殖，以及阻止樹突狀細胞遷移和內吞功能。本實驗研究發現濃度為20 μmol/L姜黃素作用于CIK細胞時其殺傷胃腺癌SGC-7901細胞活性明顯減低，與上述結果一致。

CIK細胞是一類非主要組織相容性復合物(major histocompatibility complex，MHC)和非T細胞受體限制性的免疫活性細胞[9] ，表型以CD3+CD8+和CD3+CD56+為主。Mehta等[10]研究認為， CIK細胞通過釋放穿孔素和顆粒酶而裂解靶細胞，提示細胞裂解為殺傷靶細胞的主要機制。穿孔素是存在于細胞毒性T淋巴細胞、自然殺傷(natural killer，NK)細胞和γδ T細胞胞質中的細胞毒顆粒，當這些細胞與靶細胞接觸后可釋放穿孔素，在靶細胞膜上形成多聚穿孔素管狀通道，導致靶細胞溶解破壞。顆粒酶B是殺傷性T淋巴細胞和NK細胞顆粒(granule)中最重要的絲氨酸蛋白酶，通過Caspases依賴途徑、直接入核途徑及不依賴Caspases的胞質途徑殺傷靶細胞。本實驗研究顯示，濃度2.5～10 μmol/L的姜黃素作用于CIK細胞后，其殺傷活性的增高與其表達的穿孔素和顆粒酶B水平呈正相關，且與CIK細胞的CD3+CD56+表型表達升高一致，考慮CIK細胞殺傷活性增強可能與CIK細胞群中的CD3+CD56+表達增高及其釋放穿孔素和顆粒酶B水平升高有關。然而，姜黃素誘導后的CIK細胞CD3+CD8+表型下降機制尚不明確，有待進一步研究。

本實驗研究表明，濃度為1.25 μmol/L的姜黃素對CIK細胞的殺傷活性影響不明顯，濃度為2.5～10 μmol/L的姜黃素作用于CIK細胞后，其殺傷活性隨姜黃素濃度的增加逐漸增強，但當藥物濃度過高(達20 μmol/L)時反而會抑制CIK細胞的殺瘤作用。這與Sharma等[11]報道的低濃度姜黃素能增強單核巨噬細胞吞噬功能，高濃度則抑制其吞噬功能的結果類似。因此，姜黃素對CIK細胞作用的影響存在最適濃度現象，這一點在設計實驗和臨床應用時要加以注意。

參考文獻

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[9] Schmidt- Wolf IG， Lefterova P， Mehta BA， et al. Phenotypic characterization and identification of effector cells involved in tumor cell recognition of cytokine-induced killer cells [J]. Exp Hematol， 1993， 21 (13):1673-1679.

刺猬的擁抱范文第4篇

（一）刺猬

叔本華說，人都是刺猬，即使在冰冷的冬天，也不能相互擁抱。因為

靠得近了，它們身上的刺會傷害到彼此；靠得遠了，卻又抵抗不住那凜冽的刺骨的寒風。于是它們不停地靠近、傷害、離開，又因為冷而寂寞靠近，就這樣春夏秋冬周而復始。你知道的，我從來都不曾相信叔本華，從來都不相信的。他是個徹徹底底的悲觀主義者，所以他一直都沒有找到可以擁抱可以傷害的人，孤獨到老。我想告訴你，即使寒風再凜冽兩只

(

受難的

)

刺猬依然可以躲在單薄的

（

的

）

小樹葉下面

(

簡單的

)

依戀，

(

以最純樸的感情

)

用幸福取暖。也許一年后春暖花開的時候，經歷了一冬，冰雪消融，

它們

也磨合得差不多了。

一年后的絢麗純美的時光，他們用字字句句在指間刻下幸福的痕跡，并且，

刺猬的擁抱范文第5篇

一條魚靜靜地游過來，游到了刺猬的心中，揉碎了水草里的夢。

“為什么你總是那么憂郁呢？”魚默默地問刺猬。

“我憂郁嗎？”刺猬輕輕地笑了。

魚溫柔地注視著刺猬，默默地撫摸著刺猬的憂傷，輕輕地說：“讓我來溫暖你的心。”

上帝啊，魚和刺猬相愛了！

上帝說，你見過魚和刺猬的愛情嗎？

刺猬說：“我要把身上的刺一根根拔掉，我不想在我們擁抱的時候刺痛你。”

魚說：“不要啊，我怎么忍心看你那一滴滴流淌下來的鮮血？那血是從我心上淌出來的。”

刺猬說：“因為我愛你！愛是不需要理由的。”

魚說：“可是，你拔掉了刺就不是你了。我只想要給你以快樂……”

刺猬說：“我寧愿為你一點點撕碎自己……”

刺猬在一點點拔自己身上的刺，每拔一下都是一陣揪心的疼，每一次都疼在魚的心上。魚渴望和刺猬做一次深情的相擁，它一次次地騰越而起，每一次的縱身是為了每一次的夢想，每一次的夢想是每一次跌碎的痛苦。

魚對上帝說：“如何能讓我有一雙腳，我要走到愛人的身旁？”

上帝說：“孩子，請原諒我的無能為力，因為你本來就是沒有腳的。”

魚說：“難道我的愛錯了？”

上帝說：“愛永遠沒有錯。”

魚說：“要如何做才能給我的愛人以幸福？”

上帝說：“請轉身！”

魚毅然游走了，在遼闊的水域下，魚閃閃的鱗片漸漸消失在刺猬的眼睛里。

刺猬說：“上帝啊，魚有眼淚嗎？”

上帝說：“魚的眼淚流在水里。”