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淋巴細(xì)胞范文第1篇

關(guān)鍵詞: 吸煙;免疫系統(tǒng);T細(xì)胞

摘 要:目的 探討長期吸煙對免疫系統(tǒng)影響的機(jī)制. 方法 分別于3mo和9mo對吸煙組及對照組大鼠行抗體形成細(xì)胞（AFC）試驗(yàn)和抗CD3 抗體誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖試驗(yàn)以測定其體液和細(xì)胞免疫. 結(jié)果 9mo后，吸煙組大鼠對綿羊紅細(xì)胞的抗體形成細(xì)胞反應(yīng)及抗CD3 抗體誘導(dǎo)的增殖反應(yīng)均較對照組顯著降低，而3mo時無顯著差異. 結(jié)論 長期吸煙所引起的免疫抑制是與抗原刺激T細(xì)胞后，T細(xì)胞不能有效地活化、增殖和分化有關(guān)，T細(xì)胞自身的細(xì)胞免疫受到損傷，也使得它不能有效地輔助B細(xì)胞進(jìn)行增殖及產(chǎn)生抗體，從而使體液免疫也變得無能.

Keywords:smoking;immunization system;T cells

Abstract:AIM To investigate the mechanism of how cigarette smoke affects the immunization system.METHODS Antibody-forming cell response and assay for anti-CD3 -in-duced proliferation were performed to determine the cellular and humoral immunity after3and9months’smoking.RESULTS Compared to those of the control group，the an-tibody-forming cell response and anti-CD3 -induced prolifera-tion of smoking group reduced significantly after9months，while there was no significant difference between the two groups after3months.CONCLUSION Immunosuppression caused by chronic exposure to cigarette smoke is related with the impairment of antigen mediated signaling in T cells.The impairment leads to the significant reduction of activation and　proliferation of T cells，which in turn causes the impairment of the cellular immunity and thereby the disability to help the B cells to produce antibodies.Therefore，the humoral immu-nity is anergy as a result.

0 引言

吸煙是影響身體健康的一個重要因素，可以顯著升高心臟病、腫瘤、急慢性呼吸道感染的發(fā)病率.有人認(rèn)為就是因?yàn)槲鼰熕鸬拿庖呦到y(tǒng)的損害才導(dǎo)致了人體對這些疾病的易感性［1］ .吸煙可影響廣泛的包括體液的和細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)功能［2］ .盡管人們了解到長期吸煙會影響兔子、猴和人類的T細(xì)胞反應(yīng)，但其確切的分子機(jī)制卻尚未闡明.大鼠若長期暴露于煙草的主要毒性成分尼古丁，抗體形成細(xì)胞的反應(yīng)就會受到影響.其原因可能是T細(xì)胞的反應(yīng)性增殖降低，也可能是T細(xì)胞依賴的抗體反應(yīng)降低.然而，吸煙對T細(xì)胞功能影響的機(jī)制人們尚未清楚，這種免疫抑制有可能與T細(xì)胞內(nèi)抗原介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)受損有關(guān)［3］ .除尼古丁之外，煙草中含有成千上萬種其他毒性物質(zhì).為研究吸煙引起的免疫抑制的分子機(jī)制，我們給SD大鼠每日持續(xù)吸煙數(shù)小時，持續(xù)9mo，然后觀察其免疫功能的改變.

1 材料和方法

1.1 材料 ①動物:4～5wk齡的SD雄性大鼠共50只購自本校實(shí)驗(yàn)動物中心，到6wk齡時按質(zhì)量隨機(jī)分為對照組和吸煙組，3，9mo時分別處死10，15只.②抗CD3 抗體購自北京中山公司.

1.2 方法 ①煙卷點(diǎn)燃后通過與飼養(yǎng)籠相通的進(jìn)氣管吹入，吸煙組每日暴露6h，對照組暴露于正常飼養(yǎng)環(huán)境.②免疫:大鼠在處死之前4d給予iv5×108 綿羊紅細(xì)胞.③淋巴細(xì)胞的準(zhǔn)備:取大鼠脾臟后將之研碎，經(jīng)不銹鋼濾網(wǎng)過濾后用NH4 Cl溶液將紅細(xì)胞溶解，將脾細(xì)胞過nylon wool柱，不結(jié)合nylon wool柱的細(xì)胞為T淋巴細(xì)胞，從而將T淋巴細(xì)胞分離出來，然后再用流式細(xì)胞儀分析;經(jīng)不銹鋼濾網(wǎng)過濾的脾細(xì)胞用小鼠抗大鼠CD3 單克隆抗體，再在用抗小鼠IgG抗體包被的板上孵育，CD3+ 的細(xì)胞被除去，非結(jié)合細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀分析.④抗體形成細(xì)胞（AFC）試驗(yàn)［4］ :不同濃度的脾細(xì)胞與20μmol?mL-1 的綿羊紅細(xì)胞、25μL豚鼠補(bǔ)體混合，再用含100μmol?mL-1 胎牛血清的RPMI1640將液體總量加到150μL，37℃培養(yǎng)45min，然后記數(shù)抗體形成細(xì)胞.⑤抗CD3 抗體誘導(dǎo)的T細(xì)胞的增殖試驗(yàn):在96孔板中加入含2×105 個細(xì)胞的培養(yǎng)液0.2mL，一組加入5μg?mL

-1 的抗CD3 抗體，另一組不加，37℃培養(yǎng)3d后摻入3 H（0.5μCi/孔），測定.

2 結(jié)果

2.1 長期吸煙對抗體形成細(xì)胞反應(yīng)的影響 3，9mo后，與對照組相比，吸煙大鼠脾細(xì)胞的T，B淋巴細(xì)胞所占比例無明顯差異.經(jīng)綿羊紅細(xì)胞免疫4d后，對兩組大鼠的抗體形成細(xì)胞反應(yīng)進(jìn)行了測定，結(jié)果表明9mo時吸煙組大鼠對綿羊紅細(xì)胞的抗體形成細(xì)胞反應(yīng)較對照組顯著降低（P

圖1 略

2.2 吸煙對TCR介導(dǎo)的T細(xì)胞增殖的影響 有研究表明，長期吸煙可以減低T細(xì)胞對其有絲分裂原的反應(yīng)［5］ .我們用抗CD3 抗體直接連接TCR，誘導(dǎo)T細(xì)胞的增殖，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，吸煙9mo時的大鼠對抗CD3 抗體誘導(dǎo)的增殖反應(yīng)較對照組顯著性降低（P

圖2 略

3 討論

有報(bào)道表明，長期吸煙可以降低機(jī)體的免疫力，而且很可能是同時抑制了體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)［6］ .作為煙草中的主要毒性成分，尼古丁可以導(dǎo)致T細(xì)胞的反應(yīng)無能，而且很可能是與抗原介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的損傷及細(xì)胞內(nèi)Ca2+ 反應(yīng)抑制相關(guān)［3］ .

從本研究結(jié)果看，吸煙早期（3mo）并不引起顯著的免疫力降低，而長期吸煙不僅會導(dǎo)致體液的，而且會導(dǎo)致細(xì)胞免疫的損傷，說明免疫力的降低是一個損傷逐漸積累的過程.吸煙若能在早期及時戒煙，對機(jī)體免疫力的損傷是不會很大的.長期吸煙并不引起淋巴細(xì)胞數(shù)量和比例的改變，這說明吸煙引起的免疫抑制并不是由于淋巴細(xì)胞數(shù)量和比例的改變引起的，而是T、B淋巴細(xì)胞的功能障礙.長期吸煙者的T細(xì)胞在接受了外源性抗原刺激后，并不能夠被有效激活、增殖和分化，細(xì)胞免疫受到損傷，也使得它不能有效地輔助B細(xì)胞進(jìn)行增殖和分化，這很可能是體液免疫降低的一個重要原因.作為煙草中的主要毒性成分，尼古丁可以導(dǎo)致T細(xì)胞的反應(yīng)無能，而且很可能是與抗原介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的損傷及細(xì)胞內(nèi)Ca2+ 反應(yīng)抑制相關(guān)［3］ .

蛋白磷酸化是細(xì)胞調(diào)節(jié)過程中一個主要的作用方式.抗原刺激T細(xì)胞后，蛋白酪氨酸激酶被活化，這就會通過酪氨酸依賴的機(jī)制激活磷脂酶C-γ1（PLC-γ1）及產(chǎn)生IP3［7］ .而IP3是人們所熟知的引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+ 迅速、持久上升的重要介質(zhì).IP3的產(chǎn)生和細(xì)胞內(nèi)Ca2+ 的蓄積是T細(xì)胞發(fā)揮其功能的基本條件，因而，長期吸煙所引起的T細(xì)胞的功能障礙很可能是由IP3產(chǎn)生或Ca2+ 蓄積障礙所引起的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑受損引起的.

參考文獻(xiàn)

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淋巴細(xì)胞范文第2篇

關(guān)鍵詞：淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)末梢血臨床各科疾病關(guān)系

末梢血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)國內(nèi)醫(yī)療單位尚未開展，其與臨床各科疾病的關(guān)系并不十分清楚，在疾病診治中的意義國內(nèi)雜志報(bào)道甚少。為了探討末梢血淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化與各科常見疾病的關(guān)系，我們對各科常見病種住院患者逐例采末梢血做淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

一、對象和方法

1.1對象;診斷明確的各科（內(nèi)、外、婦、兒、產(chǎn)科）常見疾病。年齡性別隨機(jī)選擇，逐例詢問病史并登記，重復(fù)病例總結(jié)時只算一人次結(jié)果，兩種或兩種以上疾病同時存在于一患者時剔除。

1.2對照組:選37例健康體檢者為對照。

1.3方法：取觀察組及對照組人員末梢血40uL，用9%EDTA2K25ul抗凝，用ABXMICROS60—OT全自動血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，由專人操作，并在標(biāo)本留取后0.5—1h內(nèi)完成測定。其溶血劑、稀釋液為原配試劑，抗凝劑按廠家提供的配方自配，并做全血指控。

二、結(jié)果

內(nèi)科常見6種疾病中以病毒性肝炎末梢血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)最低，較健康人群的1.76658х10/LDI低42.5%，兩者相比t值為6.5563，P<0.01，具有顯著性差異。降低幅度最小的是糖尿病患者，降低幅度為對照組的23.4%,l兩者相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.8175,P>0.05)。其它幾種疾病均有不同程度的下降，與對照組比均有顯著差異，其顯著水平見表1。

表1臨床各科不同疾病淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果

科別病種疾病例數(shù)STP

內(nèi)科腦血管病221.12550.40114.44<0.01

心血管病171.14120.38863.93<0.01

糖尿病81.35320.48861.82>0.05

肝炎231.01570.29506.556<0.01

肺炎71.22000.54452.26<0.05

腎炎51.16800.24452.20<0.01

外科外傷481.19660.37215.90<0.01

腰間盤突出121.14250.29373.47<0.01

癌癥71.16290.55632.40<0.05

兒科上感232.69741.13954.10<0.01

腸炎61.99330.66520.90>0.05

婦科惡葡111.29270.27372.50<0.05

癌癥9

1.05780.43743.30<0.01

產(chǎn)科產(chǎn)后141.3.430.40362.60<0.01

對照體檢371.76650.5874

外科、婦科、產(chǎn)科住院病例亦有不同程度的下降，其下降幅度與正常人比較均有顯著差異。兒科病例比較特殊，兩組病例與對照組比較均有不同程度的升高，可能與年齡因素有關(guān)。外科癌癥病人檢測7例、婦科癌癥病人檢測9例，兩組與對照組比較下降均有顯著意義。另外，檢測例較少的甲狀腺機(jī)能減退，其值0.54X10/L,較正常對照亦明顯為低，發(fā)燒待診各科病例病情不同。其降低幅.度差別較大，未做分析。末梢血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與年齡的關(guān)系，因檢測例數(shù)偏少，只做粗略分析，見表2。

表2臨床各科病例淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)年齡分布

科別病種疾病例數(shù)年齡均數(shù)S細(xì)胞均數(shù)

內(nèi)科腦血管科2157.910.81.1255

心血管科1755.315.01.1412

糖尿病856.913.81.3325

肝炎2336.512.81.0167

肺炎752.521.21.2200

腎炎529.67.01.1680

外科外傷4813.817.31.1966

腰間盤突出1243.213.01.1425

癌癥750.916.01.1629

兒科上感234.83.82.6974

腸炎66.51.41.9933

婦科惡葡1125.69.31.2927

癌癥936.715.21.0578

產(chǎn)科產(chǎn)后1424.73.41.3043

對照體檢3744.911.51.7665

從本次檢測臨床各科的患者年齡狀況分析，出兒科外，均以中老年為主。根據(jù)其末梢血淋巴細(xì)胞數(shù)可以得出：中老年組其數(shù)量的變化與年齡關(guān)系不密切，而與疾病的種類及病變程度有關(guān)。見表1.兒科病例除與病種病情有關(guān)外，與年齡亦有較大關(guān)系。說明兒科末梢血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)較成人為高。

三、討論

本次檢測臨床各科病人212例，結(jié)果表明：不論患那種疾病，末梢血中淋巴細(xì)胞的數(shù)量均有不同程度的下降，與正常組比較多有顯著差異，而且有些病種下降幅度很大，例如病毒性肝炎病人，下降幅度為對照組的42.5%，說明末梢血淋巴細(xì)胞的變化與某些疾病的病理變化關(guān)系密切。

本次檢測對照組37例，其均數(shù)為1.7665×10/L與文獻(xiàn)（1）1.684×10/L,文獻(xiàn)（2）1.800×10/L,結(jié)果相近，故正常對照組抽樣合乎實(shí)際情況。

淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與年齡存在一定關(guān)系，但不是相關(guān)關(guān)系。與國內(nèi)文獻(xiàn)（1）(兒童正常值為3.527±0.727×10/L，成人為1.684±0.404×10/L）相吻合，并與血常規(guī)兒童白細(xì)胞總數(shù)和淋巴細(xì)胞分類較成人高吻合。本次檢測兒科病例組淋巴細(xì)胞數(shù)雖較對照組為高，而且具有顯著意義，但與兒童正常組比較，其下降幅度仍很大,t檢測上感組為3.94；腸炎組t值為5.64，P值均小于0.01，其結(jié)論與中老年組比對照組相同。:

末梢血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)是否還受其它因素（藥物、氣候、性別及生理狀況等）的影響，有待進(jìn)一步的研究。

參考文獻(xiàn)

淋巴細(xì)胞范文第3篇

【關(guān)鍵詞】 自然流產(chǎn);死胎;封閉抗體;淋巴細(xì)胞免疫治療

自然流產(chǎn)的發(fā)生與母體缺乏封閉抗體有關(guān),流產(chǎn)次數(shù)越多的患者,其體內(nèi)封閉抗體缺乏的可能性越大,80%～90%封閉抗體陰性,封閉抗體的產(chǎn)生不足,母體對胎兒產(chǎn)生強(qiáng)烈的排斥現(xiàn)象,發(fā)生于孕早期可出現(xiàn)反復(fù)自然流產(chǎn),孕晚期則可出現(xiàn)妊娠高血壓疾病、胎兒宮內(nèi)生長受限、甚至出現(xiàn)胎死宮內(nèi)。淋巴細(xì)胞免疫治療亦稱淋巴細(xì)胞主動免疫,是從丈夫或無血緣關(guān)系的健康第三者血液中提取少量淋巴細(xì)胞,注射給妻子,這種異體血液制品可刺激妻子體內(nèi)產(chǎn)生一種保護(hù)性抗體,保護(hù)胎兒免受母體的免疫攻擊。廣東省茂名市婦幼保健院婦產(chǎn)科自2009年6月至2010年2月共收治封閉抗體陰性,曾有自然流產(chǎn)史或死胎史患者49例,其中19例已妊娠,均給予淋巴細(xì)胞免疫治療,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2009年6月至2010年2月在本院就診,月經(jīng)規(guī)則,夫妻雙方染色體核型分析正常,夫妻身體健康,乙肝表面抗原陰性,肝功能正常,沒有血液傳染性疾病,妻子內(nèi)分泌檢查正常,無生殖器畸形,沒有婦科合并癥,無感染,妻子封閉抗體陰性,血液IgG抗體正常,封閉抗體檢測陰性有自然流產(chǎn)或死胎,未懷孕30例,早孕19例;年齡20～41歲,平均28.1歲。

1.2 方法

1.2.1 一般情況了解 詳細(xì)詢問患者過去史,現(xiàn)病史,月經(jīng)生育史,家族史及配偶的一般情況。

1.2.2 常規(guī)檢查 行夫妻雙方染色體婦科,妻子盆腔B型超聲,宮腔鏡檢查,丈夫檢查未見異常。RT、BC,細(xì)菌培養(yǎng)+藥敏,支原體培養(yǎng)+藥敏,衣原體檢查,淋病奈瑟氏菌PCR,性激素六項(xiàng)及甲狀腺功能測定等,排除原因明確流產(chǎn)或死胎。

1.2.3 49例患者均在實(shí)施免疫治療前及27例未妊娠患者治療后1療程或2療程后2周,各行1次封閉抗體檢測,觀察并記錄妊娠情況,新生兒出生時情況,(如孕周,體質(zhì)量,有無畸形等)

1.2.4 免疫治療 采用無菌法,取丈夫或(若丈夫血液不適宜,無血源關(guān)系,無血液性傳染病的健康第三者)靜脈血20 ml加入肝素鈉抗凝,按1:1取淋巴分離液20 ml,將分離液放于試管下,將血液置于淋巴分離液上方,第一次離心,2000 r/min,離心30 min,離心后離心管由上至下細(xì)胞分四層: 一層:血漿或漿液層;二層為環(huán)狀棉絮樣乳白色細(xì)胞層;三層為透明分離液層;四層為紅細(xì)胞層。用無菌吸管吸出第二層細(xì)胞,置入另一管,加入0.9% 氯化鈉注射液至12 ml,用無菌吸管混勻,第二次離心,1800 r/min,離心20 min,離心后倒掉上清液,加入0.9%氯化鈉注射液12 ml用無菌吸管混勻,第三次離心,1800 r/min,離心10 min,離心后倒掉上清液,加入0.9%氯化鈉注射液12 ml用無菌吸管混勻,第四次離心,1800 r/min,離心10 min,離心后倒掉上清液,加入0.9%氯化鈉注射液2 ml洗滌,分別注入1 ml注射器2個,于妻子兩側(cè)上臂皮下注射,每側(cè)注射三個點(diǎn),每4周1次,連續(xù)3次,2周后復(fù)查封閉抗體,若封閉抗體仍陰性,再重復(fù)1個療程(為每4周1次,共3次),陽性后懷孕,妊娠后再同法免疫治療3次。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 所有資料均采用χ2檢驗(yàn)

2 結(jié)果

2.1 免疫治療后封閉抗體陽性情況 30例未懷孕者,26例陽性,3例無復(fù)查;19例妊娠者無復(fù)查,陽性率80%。

2.2 30例未妊娠患者免疫治療后, 8例再次妊娠,現(xiàn)無流產(chǎn)征象,繼續(xù)免疫治療。

2.3 19例妊娠者,免疫治療后,16例妊娠成功,3例自然流產(chǎn),3例已孕足月順產(chǎn),新生兒體質(zhì)量正常,無畸形,13例繼續(xù)妊娠,定期產(chǎn)檢,無早產(chǎn)征象,B超監(jiān)測胎兒無異常,妊娠成功率84.2%,無妊娠并發(fā)癥。

2.4 免疫治療后49例均無不良反應(yīng)。

3 討論

未行免疫治療前,患者由于封閉抗體陰性,使胎兒易受母體細(xì)胞免疫應(yīng)答,發(fā)生母體免疫系統(tǒng)排斥胎兒的反應(yīng),導(dǎo)致流產(chǎn),用丈夫或健康第三者的淋巴細(xì)胞抗原,對妻子進(jìn)行主動免疫治療3個月后,患者封閉抗體陽性率明顯提高,使胎兒不易受母體免疫系統(tǒng)排斥,胎兒形成耐受,因而可在母體環(huán)境中存活下來,使妊娠成功率提高,主動免疫治療后無FGR,無低出生體質(zhì)量兒及畸形兒,母親亦無因治療后發(fā)生一些新的免疫系統(tǒng)方面及傳染病方面的疾病,副反應(yīng)小。已有大量臨床資料證實(shí),淋巴細(xì)胞免疫治療可減少流產(chǎn)率及免疫排斥反應(yīng),提高妊娠成功率,此法安全可行。免疫治療技術(shù)安全、痛苦小、療效確切,有效地避免了傳統(tǒng)淋巴免疫治療母親對輸入的紅細(xì)胞或血小板抗原致敏感的危險(xiǎn),減少了并發(fā)癥。成功受孕率可以達(dá)95%以上。自1981年Taytor和Beer等創(chuàng)立了自然流產(chǎn)淋巴細(xì)胞主動免疫療法,經(jīng)過20余年的臨床研究表明,免疫治療確能有效阻止封閉抗體缺乏性自然流產(chǎn)。國內(nèi)外不同學(xué)者對原因不明性反復(fù)自然流產(chǎn)患者進(jìn)行淋巴細(xì)胞免疫治療后,妊娠成功率達(dá)72.73%～86.2%,且未發(fā)現(xiàn)對母、兒的副反應(yīng),封閉抗體的陽性率明顯高于治療前,而封閉抗體陽性者再次妊娠的成功率明顯高于陰性者。大量研究證實(shí)淋巴細(xì)胞免疫治療自然流產(chǎn)有效安全,并且封閉抗體對再次妊娠結(jié)局有良好價(jià)值。

參 考 文 獻(xiàn)

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[3] 孟慶勇,林萍,王鳴,等.配偶淋巴細(xì)胞免疫治療反復(fù)自然流產(chǎn)91例分析.中國優(yōu)生與遺傳雜志,2005(12).

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淋巴細(xì)胞范文第4篇

關(guān)鍵詞： 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)  末梢血  臨床各科疾病  關(guān)系

末梢血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)國內(nèi)醫(yī)療單位尚未開展，其與臨床各科疾病的關(guān)系并不十分清楚，在疾病診治中的意義國內(nèi)雜志報(bào)道甚少。為了探討末梢血淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化與各科常見疾病的關(guān)系，我們對各科常見病種住院患者逐例采末梢血做淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 對象和方法

1.1 對象; 診斷明確的各科（內(nèi)、外、婦、兒、產(chǎn)科）常見疾病。年齡性別隨機(jī)選擇，逐例詢問病史并登記，重復(fù)病例總結(jié)時只算一人次結(jié)果，兩種或兩種以上疾病同時存在于一患者時剔除。

1.2 對照組: 選37例健康體檢者為對照。

1.3 方法：取觀察組及對照組人員末梢血40uL，用9%EDTA2K25ul抗凝，用ABX MICROS60—OT全自動血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，由專人操作，并在標(biāo)本留取后0.5—1h內(nèi)完成測定。其溶血劑、稀釋液為原配試劑，抗凝劑按廠家提供的配方自配，并做全血指控。

2  結(jié)果 

內(nèi)科常見6種疾病中以病毒性肝炎末梢血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)最低，較健康人群的1.76658х10/LDI低42.5%，兩者相比t值為6.5563，P<0.01，具有顯著性差異。降低幅度最小的是糖尿病患者，降低幅度為對照組的23.4%,l兩者相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.8175, P>0.05)。其它幾種疾病均有不同程度的下降，與對照組比均有顯著差異，其顯著水平見表1。

表1  臨床各科不同疾病淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果

科別    病種   疾病例數(shù)             S      T       P

內(nèi)科  腦血管病   22     1.1255   0.4011   4.44   <0.01 

      心血管病   17     1.1412   0.3886   3.93   <0.01

      糖 尿 病    8     1.3532   0.4886   1.82   >0.05 

      肝    炎   23     1.0157   0.2950   6.556  <0.01

      肺    炎    7     1.2200   0.5445   2.26   <0.05 

      腎    炎    5     1.1680   0.2445   2.20   <0.01

外科  外    傷   48     1.1966   0.3721   5.90   <0.01

      腰間盤突出  12     1.1425   0.2937   3.47   <0.01

      癌    癥    7     1.1629   0.5563   2.40   <0.05

兒科  上    感   23     2.6974   1.1395   4.10   <0.01

      腸    炎    6     1.9933   0.6652   0.90   >0.05

淋巴細(xì)胞范文第5篇

一、材料和方法

1.被檢對象： 標(biāo)本來源于我院近10個月住院和門診280例擬做腎移植待診病人和其他器官移植待診病人，采靜脈血2 ml不抗凝待測。

2.試劑： 免疫磁珠、熒光染液由美國O L公司提供，抗全淋巴細(xì)胞抗體試劑購自武漢生物制品研究所。

3.方法：(1)改良一步法：采用免疫磁珠3～5 μl分離出淋巴細(xì)胞，在Terasaki板上每孔加入無菌礦物油5 μl，每排第1孔加生理鹽水1 μl做陰性對照，第2孔加抗全淋巴細(xì)胞抗體1 μl做陽性對照，第3～6孔各加受者血清1 μl(即重復(fù)4孔試驗(yàn))，每孔各加供者淋巴細(xì)胞1 μl(細(xì)胞濃度為2 000個/μl)，每孔各加補(bǔ)體1 μl，置22～25℃室溫下反應(yīng)45 min左右，每孔加熒光染液5 μl，倒置熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞毒性反應(yīng)，分析判斷結(jié)果。(2)傳統(tǒng)常規(guī)法見參考文獻(xiàn)［1］。

二、結(jié)果

采用改良一步法進(jìn)行了400次淋巴細(xì)胞毒交叉試驗(yàn)，有9次檢出陽性(陽性率為2.25%)。其中1例患者反復(fù)多次CDC陽性，后進(jìn)行HLA抗體檢測， 特定細(xì)胞群反應(yīng)抗體 (Panel Reactive Antibody， PRA) 陽性率為53.5%， 提示抗HLA-A2抗體增多，故放棄移植。

一步法與傳統(tǒng)法試驗(yàn)比較：樣本用量一步法1 μl，傳統(tǒng)法40 μl；試驗(yàn)全過程一步法1.5 h內(nèi)完成，傳統(tǒng)法需2.5～4 h；補(bǔ)體用量一步法1 μl，傳統(tǒng)法40 μl；30例標(biāo)本用雙盲法同時試驗(yàn)，結(jié)果一致。

三、討論

改良一步法CDC縮短和簡化了試驗(yàn)時間、操作步驟，整個試驗(yàn)過程在1.5 h內(nèi)完成。大量標(biāo)本還可同時輸入計(jì)算機(jī)分析。免疫磁珠分離淋巴細(xì)胞純度高且時間短，用熒光染色的結(jié)果容易觀察，倒置熒光顯微鏡下死細(xì)胞呈紅色，活細(xì)胞呈綠色，對比分明，易于識別。而傳統(tǒng)常規(guī)法的伊紅染色，在鏡下觀察判斷細(xì)胞死活結(jié)果有很大的難度，經(jīng)30例樣本用2種方法進(jìn)行雙盲試驗(yàn)，其結(jié)果一致，可以證明改良法在樣本用量上、淋巴細(xì)胞分離、交叉反應(yīng)時間及判斷結(jié)果上均表現(xiàn)出優(yōu)于傳統(tǒng)法的特點(diǎn)。同時改良法可節(jié)省抗全淋巴細(xì)胞抗體、補(bǔ)體等試劑用量，降低試驗(yàn)成本。